关于输血的一些事儿，相容才是彼此的选

　

输血是临床上作为治疗或辅助治疗的重要手段，但不适当的血液制品输注将造成不良后果，严重者可危急生命。

输血前检查

受血者血液标本的处理

ABO血型和RhD血型定型

红细胞同种抗体筛查和鉴定

交叉配血试验

输血前检查的目的是使输注的血液成分在受血者体内发挥其有效作用。因此在正常情况下,输入的红细胞在受血者体内应不溶血，输入的血浆成分不破坏受血者的红细胞，即输入的血液与受血者血液在免疫血液学方面“相容”，才能使受血者获益。

CrossMatching交叉配血交叉配血

主要是检在受血者血清中有无破坏供血者红细胞的抗体，使受血者与供血者的血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分。交叉配血应在任何步骤均不出现任何溶血或同种凝集的结果时，方可将供者的血液成分输给受血者。

交叉配血的内容

1.主侧配血：受血者血清与供者红细胞反应,检测受血者体内是否存在针对供者红细胞的抗体。

2.次侧配血：受血者红细胞与供者血清反应，检测供者血液中是否存在针对受血者红细胞的抗体。

3.自身对照：受血者红细胞与自身血清反应，以排除自身抗体、直接抗球蛋白试验阳性及红细胞缗钱状假凝集等干扰试验结果判读因素。

交叉配血的要求

1.交叉配血应在37℃孵育，使用能检出不完全抗体的配血方法进行交叉配血。除了盐水介质法外，至少要有抗球蛋白试验。

2.主侧交配绝对不可以有凝集和溶血现象，次侧交配，在允许条件下可以有凝集现象，但不可以溶血。

交叉配血试验方法

盐水介质试验技术

酶处理试验技术

聚凝胺介质试验技术

抗球蛋白试验技术

微柱凝集试验技术

1.盐水介质试验技术

(1)盐水介质试验技术的本质是凝集反应,属于直接凝集试验，用于检测红细胞抗原和(或)抗体。红细胞悬浮于盐水介质中,可直接与试剂血清或患者血清反应,常用于血型鉴定、血清中IgM类抗体的筛查和鉴定、盐水介质的交叉配血等。

(2)根据试验载体不同，主要分为三种方法：平板法；试管法；微孔板法。三种方法均为定性试验方法。简便快捷，主要用IgM类抗体的检测，而不能检出IgG类抗体。

(3)天然抗体与免疫血型抗体的比较

天然抗体

免疫血型抗体

性质

完全抗体

不完全抗体

Ig

IgM

IgG

抗原刺激

没有可察觉的抗原刺激

经抗原刺激后才产生

免疫发生的时间

早期

晚期

分子量

90万

15万

分子长度

沉淀系数

19S

7S

电泳分析

IgM球蛋白

IgG球蛋白

通过胎盘能力＊

不能

能

反应温度＊　

4℃比37℃强（冷抗体）

37℃（温抗体）

对血型物质＊　

能被血型物质中和

不被中和

IgM抗体

免疫球蛋白中8%-10%是由IgM组成。IgM抗体分子量大，约为90万，有十个抗原结合位点，可直接致敏和凝集红细胞，它的平均寿命为10天。

IgM抗原抗体反应中常激活补体，从而引起溶血反应。

◆◆◆◆◆

IgG抗体

IgG是体液免疫应答产生的主要抗体，在血清中含量最高。约占免疫球蛋白的75%。

IgG是唯一的能通过胎盘进入胎儿体内的免疫球蛋白，同种IgG血型抗体通过胎盘，可引起新生儿溶血病。

2.酶处理试验技术

(1)原理：红细胞膜表面唾液酸所带负电荷，能够使红细胞相互排斥，保持悬浮状态。IgG抗体分子的跨度小于正常情况下红细胞间的距离，因此与红细胞抗原结合后，不足以把红细胞拉在一起而引起可见的凝集。

蛋白水解酶作用于红细胞表面的多糖链上，切断带有负电荷的羧基差团的唾液酸，减少红细胞表面负电荷,缩短红细胞之间的距离，增强IgG抗体对红细胞的凝集。

(2)目前常用的酶有:木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶、胰蛋白酶等。

(3)酶试验技术分类分为一步法和二步法。在血清和红细胞反应体系中直接加入酶液促进血清中抗体与相应红细胞反应，引起特异性凝集，称之为一步法。操作简便，但敏感性较二步法差。先用酶液孵育红细胞后，洗涤去净酶液,增强红细胞抗原性，再加入血清使不完全抗体与之发生反应，出现特异性凝集，称之为二步法。操作步骤多,较为复杂,但敏感性强。

3.聚凝胺介质试验技术

(1)原理：聚凝胺是一种由4个胺聚合而成的高阳离子聚合体，在溶液中有多个阳离子集团，能够中和红细胞表面的负电荷，从而缩短红细胞间的正常距离，使正常红细胞形成可逆的非特异性聚集，同时也使IgG类抗体直接凝集红细胞。然后加入枸橼酸重悬液(中和液)后，仅由聚凝胺引起的非特异性聚集会因电荷中和而消失，而由抗体介导的特异性凝集则不会消失，呈现出肉眼可见的凝集现象。

(2)目的：聚凝胺技术用来检测红细胞不完全抗体，特点是灵敏、速度快、准确、操作要求高。

注意：不能使用含枸橼酸钠和肝素抗凝标本。

4.抗球蛋白试验技术

(1)原理：抗球蛋白试验是由Coombs等于年发明的经典血清学试验方法,故该试验又称为Coombs试验，主要用于检测血清中的不完全抗体和(或)补体。

不完全抗体只能与一方红细胞抗原决定簇结合，不能同时与双方红细胞抗原决定簇结合。所以在盐水介质中，不完全抗体只能致敏红细胞,而不能使红细胞出现可见的凝集反应。加入抗球蛋白试剂后，抗球蛋白分子的Fab片段与包被在红细胞上的球蛋白分子的FC片段结合，从而通过抗球蛋白分子的搭桥作用而产生红细胞凝集，未被抗体致敏的红细胞不会发生凝集。

Coombs试验是利用抗球蛋白抗体作为第二抗体，连接与红细胞表面抗原结合的特异抗体，使红细胞凝集。

抗球蛋白试验中球蛋白指IgG、C3片段、C4片段、IgM、IgA等，但主要指IgG和C3片段。

IgG型抗体与红细胞表面相应抗原结合后致敏，但不产生可见的凝集反应，属不完全抗体。

IgG具有很好的免疫原性，用其免疫动物（或通过杂交瘤技术）可获得相应抗体，即抗IgG（亦称抗抗体）。

(2)Coombs试验分为直接试验(直接反应)和间接试验(间接反应)

直接试验的目的是检查红细胞表面的不完全抗体；

间接试验的目的是检查血清中存在游离的不完全抗体。

抗球蛋白法配血法是最早用于检查不完全抗体的方法，也是最可靠的确定不完全抗体的方法。

(3)应用：直接抗球蛋白法可检查受检者红细胞是否已被不完全抗体致敏；间接抗球蛋白法可用于鉴定Rh血型及血清中是否存在不完全抗体。

本法虽较灵敏，但也有一定限度，且操作复杂，不利于急诊检查和血库的大批量工作。

5.微柱凝胶试验技术

(1)原理：特定配比的前聚糖凝胶分装于特制的凝胶柱中，制各成微柱凝胶卡。凝胶柱的上层为“反应池”(抗原抗体反应区);柱的下层为“分离池”，在一定的离心力作用下，未凝集的红细胞沉淀于底部，为阴性反应；凝集的红细胞被凝胶阻滞留于凝胶介质的顶部或介质的中间，为阳性反应。

在微柱凝胶介质中含有抗人球蛋白试剂，称之为微柱凝胶抗人球蛋白试剂，含有抗球蛋白试剂的微柱凝胶，可进行抗球蛋白试验。

交叉配血的结果和解释及其可否输血

主侧次测

自身对照

判定解释

酶法和抗人球法

酶法

抗人球法

1

－

－

－

－

适合Ⅰ

2

＋

－

－

－

不适合Ⅱ

3

－

＋

－

－

不适合Ⅲ

4

＋

＋

－

－

不适合Ⅳ

5

－

＋

＋

＋

保留Ⅴ

6

＋

－

＋

－

保留Ⅵ

7

＋

＋

＋

＋

保留Ⅶ

解释：

Ⅰ适合：能输血

II不适合：不能输血

①怀疑ABO血型不合

②怀疑患者存在不规则抗体

③偶尔供血者直抗阳性

III不适合：不能输血①怀疑ABO血型不合②怀疑供血者存在不规则抗体③受血者存在多凝集现象Ⅳ不适合：不能输血①怀疑ABO血型不合②怀疑患者及供血者存在不规则抗体Ⅴ保留

不能终止输血的情况下，严密监视的情况下进行，如有异常。立即终止。输血患者直接抗球蛋白试验阳性（可能的原因是有冷自身抗体，药剂血浆蛋白制剂以及红细胞抗体等存在）

Ⅵ保留

①输血时严密监视进行，如有异常，立即终止。

②生理盐水强阳性时：怀疑有冷凝集，缗钱状凝集，多凝集反应等。

③酶法试验强阳性时：考虑是菠萝酶非特异型反应（用抗球蛋白法重做交叉配合试验）

Ⅶ保留

①不输血为宜，输血不能终止时，在严密监视下进行如有异常立即终止。

②因温式或冷自身抗体，以及血浆蛋白制剂中的抗红细胞抗体等原因，患者血清中也存在同样抗体的情况。

③怀疑自身抗体与同种抗体并存。

交叉配血的影响因素

1.缗钱状形成:被检血清在室温和37C中,使红细胞出现了缗钱状假凝集,造成配血结果误判。常见于巨球蛋白血症、多发性骨髓瘤、霍奇金病，以及其他表现为血沉加速的一些病例。

2.在室温条件下，配血结果阳性,说明受血者血液中可能存在自身抗体或IgM类同种抗体。

3.出现抗体筛查试验阴性和交叉配血结果阳性的现象,提示受血者血清中可能存在未检明的抗体。

4.直接抗球蛋白试验阳性，显示受血者或供血者有自身抗体。

5.蒸馏水中某些离子干扰，造成不正确的结果。

6.孵育温度不准确，造成错误结果。

7.在交叉配血试验操作过程中，应用离心力不当，造成了假阴性和假阳性。

8.在被检血清中如含有溶血性抗体，则具有相应抗原的红细胞被溶解而不是凝集,此种情况下交叉配血结果应为阳性。如果血清中存在补体而导致溶血反应，血清应灭活后再做试验。

9.红细胞不正确的洗涤和悬浮，使抗球蛋白试验出现假阴性。

实验操作

实验室所用微柱凝胶卡（空白）

实验室操作：

1、取出微柱凝胶卡，室温平衡并做好标记。

2、将供（受）血标本制备0.5%红细胞低离子介质悬液。

3、通常一个标本使用两个微柱凝胶管，主侧加入受血者血清与供者红细胞反应，次侧加入受血者红细胞与供者血清反应。

4、不孵育，将卡放入专用离心机离心。

5、取出凝集Coombs卡，观察试验结果。

Q:微柱凝胶试验技术简单方便，结果准确，敏感性好，而且结果保存时间长，标本用量少，完全可以取代其他技术。你认为呢？

微柱凝胶卡可能出现的问题

假阳性反应

(1)未完全去除纤维蛋白原的血清标本在凝胶中形成纤维蛋白，能够阻碍红细胞沉降面浮于胶中或胶表面而造成假阳性。

(2)抗凝剂不足或不含抗凝剂的血浆标本常常易出现假阳性

(3)被检标本污染细菌使红细胞浮于胶中或胶表面。

假阴性反应

(1)抗原或抗体过少、过弱。

(2)抗原、抗体比例不当时也容易产生假阴性。

(3)离心力过大时，容易使弱阳性成为阴性格局

(4)未加人抗体等人为实验操作错误。

BloodConstituent血液科常见血液成分

悬浮少白红细胞、病毒灭活血浆、

辐照单采血小板、冷沉淀因子

悬浮少白红细胞

制备

（1）悬浮少白细胞红细胞（SLRBC）是将采集到多联袋的全血中的大部分白细胞、血小板及血浆在全封闭的条件下去除后向剩余物加入红细胞保存液所制成的红细胞成分血。

（2）目前采用白细胞滤器过滤，可达减除白细胞清除率可达99%，一般可使白细胞降至1.0X~1.0X/袋，红细胞回收率大于90%。

保存

（1）悬浮少白红细胞制剂应保存在4℃士2℃，含CPDA-1、MAP、SAGM保养液的红细胞保存期为35天，含AS-1、AS-3、AS-5保养液的红细胞为42天。

（2）悬浮少白红细胞的优点：减少血液储存损伤，减少白细胞引起的免疫反应的发生，减少输血相关性移植物抗宿主病的发生，减少免疫抑制功能。

少白红细胞的适应症

由于反复输血已产生白细胞或血小板抗体引起非溶血性发热反应的患者；准备作器官移植的患者；需要反复输血的患者，如再生障碍性贫血、白血病、重型地中海贫血等患者，可以从第一次输血起就选用本制品。

辐照单采血小板

制备

单采血小板是用血液成分单采机采集来自一个献血者的血小板。我国规定单采血小板计数应达到≥2.5×/袋，白细胞混入量≤5.0×/袋，红细胞混入量≤8.0×/袋。与浓缩血小板比较，单采血小板最大的优点是相对安全，受血者只需要接受一个献血者的血小板即可达到治疗量，可以降低发生HLA同种免疫反应和输血传染病的风险几率。辐照的目的是灭活免疫活性淋巴细胞，预防输血相关移植物抗宿主病（TA-GVHD）。

血小板输注

预防性输注血小板

（1）当血小板计数低于20×／L伴有严重出血者应输注血小板。

（2）血小板计数低于5×／L无论有无明显的出血都应及时输注血小板，以免颅内出血。

（3）血小板计数低下的患者手术或侵入性检查，血小板计数低于50×／L者需预防性输注血小板，同时应考虑手术部位（是否利于压迫止血）和手术的大小，脑部或眼部手术须提高血小板计数×／L。

2.治疗性输注血小板

（1）大量输血所致的血小板稀释性减少，血小板计数低于50×／L伴有严重出血者。

（2）脾肿大正常人约1／3血小板贮留于脾脏，脾肿大则脾贮留血小板增多。

（3）感染和DIC严重感染特别是格兰阴性细菌感染者，血小板计数低下是常见并发症，可能由于血小板寿命缩短，或者骨髓造血受抑制，或两者兼而有之。若血小板计数降至极低水平并引起出血，则需输注血小板且起始剂量应加大。对DIC首先应针对病因治疗，若是血小板计数降低引起的出血，应输注血小板。

（4）特发性血小板减少性紫癜（ITP)ITP患者体内存在针对血小板的自身抗体，在体外可与多数人血小板起反应。ITP患者输注血小板后血小板的寿命明显降低，甚至使低下的血小板降至更低，因此患者输注血小板时应严格掌握指证：

（ⅰ）脾切除治疗的术前或术中有严重出血者

（ⅱ）血小板计数低于50×／L并伴有出血可能危及生命者。若输注前应用静脉注射免疫球蛋白可延长输入的血小板寿命

（5）血小板功能异常所致严重出血。

病毒灭活血浆

制备

（1）血浆是指抗凝全血经离心去除细胞有形成分后的淡黄色液体，含有水、电解质和蛋白质，主要是白蛋白、免疫球蛋白和各种凝血因子。病毒灭活血浆是分离制备或单采出的新鲜液体血浆进一步采用病毒灭活和(或)滤除白细胞等处理而来。

（2）达到减少白细胞和灭活病毒的目的，提高血浆输注的安全性。

（3）血浆病毒灭活指的是，通过物理或化学手段使病毒蛋的结构受到破坏，让血浆中可能存在的病毒失去感染、致病和繁殖能力。目前，国内广泛使用的仅有亚甲蓝光化学法血浆病毒灭活技术。

（4）亚甲蓝(MB)是一种光敏剂，可以与病毒的核酸以及病毒的脂质包膜相结合，在可见光的作用下发生光化学反应，使病毒核酸断裂、包膜破损，从而达到病毒灭活效果。

（5）MB法可以灭活大部分脂质包膜病毒，如HBV、HIV等，对非脂质包膜病毒如HAV、B19病毒等无效。光照处理后的血浆经病毒灭活装置配套用输血过滤器过滤可除去亚甲蓝和绝大部分白细胞,因此,病毒灭活血浆在进行病毒灭活的同时,还滤除了白细胞。

保存和适应症

（1）病毒灭活血浆属于普通冰冻血浆，是制备冷沉淀后所得的血浆在-20℃以下冰箱冰冻并保存而来，实际上所含的凝血因子很少。

（2）病毒灭活血浆主要用于除V和Ⅷ因子外多种凝血因子缺乏或大量输血伴有凝血障碍的患者。

冷沉淀凝血因子

制备

（1）把从ml血浆中获得的FFP置于1－5℃条件下融化，收集得到的冷不融部分称为冷沉淀。1U体积为20±5ml,主要含有≥80IU凝血因子Ⅷ，～mg纤维蛋白原（Fg)以及凝血因子纤维蛋白稳定因子（凝血因子XⅢ），纤维结合蛋白（Fn)血管性血友病因子（vWF)等。

（2）冷沉淀的组份：

Ⅷ因子(FⅧ：C)

ⅩⅢ因子（纤维蛋白稳定因子）

vWF因子（血管性血友病因子）

纤维蛋白原(Fg)

纤维结合蛋白(Fn)

输注适应症

（1）甲型血友病，冷沉淀是除FⅧ浓缩剂外最有效的制剂之一

（2）先天性或获得性的纤维蛋白原缺乏症对严重创伤、烧伤、白血病和肝功能衰竭等所致的纤维蛋白原缺乏患者，输注冷沉淀可明显改善。

（3）先天性或获得性凝血因子ⅩⅢ缺乏症，常作为FⅩⅢ浓缩制剂的替代物

血管性血友病，vWD表现为vWF缺乏或缺陷。

（4）获得性纤维结合蛋白缺乏症。纤维结合蛋白是重要的调理蛋白，在严重创伤、烧伤、严重感染、血友病、皮肤溃疡和肝功能衰竭，血浆纤维结合蛋白水平可明显下降。

Instructor指导教师

1、在交叉配血之前，首先应进行血型鉴定，确定受血者与供血者血型一致。血型相符且交叉配血实验无凝集方可进行输血。

2、微柱凝胶法结果敏感准确，且操作简便，保存时间长，在日常交叉配血工作中广泛使用。急诊输血的交叉配血所用方法为聚凝胺法，加入中和液后沉淀消失，仍需镜下观察排除微小凝集。

王浩：副主任技师，一直从事输血学检验教学与临床工作，是来自输血科的另一位美男子。

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整理美编I蒋曼莉

审校I李洪春

坚持，源自您的鼓励和分享！

内容转载自

会思考的芦苇了解更多

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