IgM测定
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IgM属于血清免疫球蛋白中的一种,占血清免疫球蛋白总量的5%-10%,血清浓度约1mg/ml。单体IgM以膜结合型(mIgM)表达于细胞表面,构成B细胞抗原受体(BCR)。分泌型IgM为五聚体,是分子量最大的免疫球蛋白,IgM的检测常用于诊断各类自免性疾病或急性感染性疾病。
酶法肌酐测定
病例情况分析
肌酐似乎与免疫球蛋白IgM没有相关性,但是笔者在实验室工作中却发现一例因肌酐结果偏低,从而发现高IgM血症的病例。具体情况如下:
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年9月18日,某患者,男,55岁,诊断颈椎病。肾功能检测尿素4.60mmol/l(1.7-8.3mmol/l)正常,肌酐结果为“-μmol/l”。肌酐出现异常负值。检验医学网
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疑似原因分析
怀疑标本性状存在问题,如严重脂血或溶血,查看标本无溶血、脂血情况。否定!
怀疑仪器检测过程中出现偶然性误差,如比色杯未清洗干净,有凝块等,重新检测标本,结果仍为负值。否定!
难道是底物耗尽?我科采用肌氨酸氧化酶法检测肌酐,通常不会存在底物耗尽的情况。否定!
在原因一直未找到的情况下,笔者尝试稀释标本进行检测,在用去离子水稀释标本过程中发现标本竟然变浑浊了。这应该就是出现肌酐为负值的原因:标本在加入R1试剂后,出现浑浊,增加了试剂空白吸光度,从而使检测结果出现了负值。检验医学网
该患者肌酐反应曲线
普通人肌酐反应曲线
加入R1浑浊原因分析
虽然试剂中化学成分非常复杂,各种稳定剂、反应物质、缓冲体系共存,但是加入试剂R1导致血清标本出现严重浑浊的事情还是少见,所以我搜索文献,试图发现点灵感。检验医学网
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这时候一篇文章引起了我的注意,虽然文章中出现的是假性升高,但是巨球蛋白这几个字眼突然如闪电般在我脑中划过。
作者开始怀疑该标本存在高浓度的IgM。因为试剂改变血清的电场环境,会造成IgM分子表面的电荷发生变化,从而导致自凝集发生。
验证过程
验证:检测免疫球蛋白、血清蛋白电泳。
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检测结果
IgM:22.1g/l(0.34-2.14g/l),
血清蛋白电泳结果:γ-球蛋白异常增高30.8%。
处理办法:联系临床,建议复查免疫球蛋白、血清蛋白电泳,并查找高IgM原因。肌酐检测建议采用苦味酸电极法检测。
最终结论
患者通过苦味酸电极法(BeckmanDXC)查出了肌酐值,为“72μmol/l”,由此可见确实是检测方法学的干扰导致了结果的异常。
该病人存在高IgM血症,高浓度的IgM分子会干扰肌酐检测(肌氨酸氧化酶法—科方试剂),至于为什么出现负值而不是文献中提到的正干扰,作者推测和试剂成分有关,当R1试剂引起浑浊时,会造成检测本底升高,从而得出负值,反之,当R2试剂引起标本浑浊,会导致测量结果升高,引起假性升高。
同理,因为苦味酸法使用的是速率法,肌酐浓度与Cr-苦味酸复合物生成速率成正比,这一反应特性很好的规避了本底的干扰。所以苦味酸法能够检测出患者的肌酐值。而现在流行的酶法,因为采用的是终点比色法,检测的是醌类色素的最终吸光度,所以会受到标本本底干扰。检验医学网
所以,虽然现在检验推荐采用酶法检测肌酐值,但是在遇到特殊情况下,仍然有一些不可避免的原因导致肌酐检测失败,所以了解检测原理,熟悉方法学是每一个检验人的必修功课,选择合适的才是最好的。
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[3]汤菲,张智慧,王宪灵,etal.湿化学酶法测定华氏巨球蛋白血症血清肌酐假性增高的评析[C]中华医学会第七次全国中青年检验医学学术会议论文汇编..
[4]PseudohypercreatininemiaduetopositiveinterferenceinenzymaticcreatininemeasurementscausedbymonoclonalIgMinpatientswithWaldenstr?m’smacroglobulinemia.HummelKM,vonAhsenN,KühnRB,KabothU,GrunewaldRW,OellerichM,MüllerGA.Nephron.
来源:检验之窗