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诊断M蛋白病多需要进行以下三种检查:
血清蛋白电泳(Serumproteinelectrophoresis,SPEP):通过电泳分离血清蛋白,能发现血液中的M蛋白并量化。若SPEP阳性,需用免疫固定电泳确证。
血清免疫固定电泳(Serumimmunofixation):利用直接识别重链和轻链的抗体区分增多的免疫球蛋白是单克隆性或是多克隆性,并确定具体类型(如IgGκ)。
血清游离轻链试验(Serumfreelightchainassay):利用抗体识别低浓度的单克隆游离轻链(κ或λ),敏感性较高,但结果可能受到肾功能的影响。
《一页手册》曾经讲过的血清蛋白电泳(回复“电泳”进行回顾),是筛查血清中M蛋白的常用方法,但它存在两个不足之处:
①M蛋白浓度低时敏感性不高;
②无法分辨重链及轻链的类型。
免疫固定电泳则可以证实是否存在M蛋白,并明确其具体类型。
正常的免疫球蛋白(Ig)单体由两条重链(Hchain)和两条轻链(Lchain)组成。根据重链的差异可将Ig分为五种类型:IgM、IgD、IgG、IgA和IgE,其相应重链分别为μ、δ、γ、α和ε。而Ig的轻链有两种:κ和λ。
免疫固定电泳的方法是,利用电泳将血清蛋白分离后,每份样品与一种针对特定重链或轻链的特异性抗体进行反应,常用的抗体包括抗γ、α、μ及抗κ、λ的抗体,与抗体发生免疫沉淀反应的条带会被染色。如下图所示:
在上图中,血清蛋白电泳(SPEP)中红色*标记的条带代表M蛋白,而该条带对应的蛋白分别与抗γ(蓝色*)及抗κ(黑色*)的抗体发生了反应,提示为IgGκ型的单克隆免疫球蛋白。
免疫固定电泳的敏感性高于血清蛋白电泳,但它并不能反映M蛋白在血清中的浓度,因此需要与血清蛋白电泳配合使用。
1.血清蛋白电泳发现M蛋白。
2.血清蛋白电泳正常,但临床怀疑多发性骨髓瘤、原发性淀粉样变性、巨球蛋白血症等疾病。
3.存在无法解释的感觉运动性周围神经病、肾病综合征、难治性心力衰竭、体位性低血压、腕管综合征、吸收不良,或其他提示原发性淀粉样变性(primaryamyloidosis,AL)的临床情况。
4.监测M蛋白病的治疗效果(尤其是M蛋白的浓度已降低到血清蛋白电泳检测不出的水平时)。
此外,由于常规免疫固定电泳只使用抗γ、α、μ的抗体,必要时还需要利用抗δ和ε抗体除外IgD和IgE型的单克隆免疫球蛋白。
血清游离轻链定量是利用抗体识别低浓度的单克隆游离轻链(κ或λ),敏感性高于免疫固定电泳。医院的正常参考范围为:κ-mg/dl,λ-mg/dl,κ/λ比值1.35-2.65。
M蛋白病的诊断、病情和疗效监测等。
对于肾功能不全的患者(肌酐清除率60mL/min),肾脏对血清中游离轻链的清除减慢,血清游离轻链浓度随之增高。
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