作者:医院杨萍
案例经过当笔者在发放生化报告过程中,看到一张生化报告单内铁检测结果为90.80umol/L,再次查看病人诊断为胸痛待查。
三系减低(RBC:2.31X/L、WBC:3.30X/L、PLT:93.0X/L、Hb:76.0g/L、铁蛋白.00ng/mL)。
谨慎起见,笔者先查看标本状态良好,无凝块与血丝,又电话联系主管大夫,告知该病人未服用影响铁检测结果的铁剂或输血治疗,只是给与普通抗生素治疗,病人虽有贫血,但不会出现如此之高的铁结果,检测结果与病人临床表现严重不一致。
那是什么原因导致这么高的结果,与临床诊断不符合呢?于是笔者查看仪器原始结果,发现该标本不仅检测值高,同时报警为“k”,根据仪器设置,只有吸光度值超过设定阈值后才会出现“k”的报警,并进行自动稀释。根据笔者多年的工作经验,未给与任何治疗的病人很少出现铁吸光度值超过限定阈值并进行自动稀释,于是查看反应曲线,为一异常反应曲线。
血清铁检测采用终点法。我室使用A厂家双试剂,根据终点法设置,共计读点40个吸光度值,当样本与R1试剂混匀后为反应准备阶段,不发生吸光度值的改变,也就是在开始读吸光度值0-22点时不会产生吸光度值改变,在加入R2试剂后,反应启动,吸光度值发生变化,在第38、39点处读取吸光度值,并计算浓度值。该反应曲线显示在样本与R1试剂混匀后即发生吸光度值改变(图一),对样本进行8稀释后结果为16.8umol/L,反应曲线正常(图二),是什么原因导致结果前后差异如此之大?反应曲线如此诡异?
图一:异常反应曲线
图二:8倍稀释后反应曲线
案例分析查看病例,发现该病人同时为高免疫球蛋白血症(IgG90.80g/L、IgA0.33g/L、IgM0.28g/L、TP:.0g/L、ALB:23.90g/L、GLB:.1g/L、β2-微球蛋白:6.65mg/L、尿轻链KAP:75.40mg/L、LAM:0.19g/L、KAP:33.90g/L)。查看厂家A铁试剂说明书及试剂成分,R1试剂PH为4.5。根据免疫球蛋白遇到强酸极易变性生理特性,推测是否为蛋白变性引起吸光度值改变?为了验证这一结论,进行以下步骤:
1、反应系统内验证
查找7份不同浓度免疫球蛋白血症患者血清,涵盖高中低三个浓度值,分别进行原倍检测及8倍稀释后检测血清铁含量。结果显示随着血清中免疫球蛋白浓度值增高,铁的检测结果越高(图三),反应曲线异常,8倍稀释后结果均正常,反应曲线正常。
图三:IgG与FE相关性
2、仪器外验证
根据A厂家试剂说明书参数设置,将上述7份标本分别吸取10ul样本与ul样本混匀后,37℃水浴5分钟,酶标仪于nm处检测吸光度值。结果显示,随着免疫球蛋白浓度值越高,吸光度值越高(图四),8倍稀释后吸光度值均在正常范围内。对以上曲线进行合成,结果显示随着免疫球蛋白浓度值增改,铁浓度值越高,OD值越高。(图五)
图四:不同浓度免疫球蛋白患者铁检测吸光度值变化图
图五:不同免疫球蛋白浓度值、铁检测结果、OD值合成曲线
3、厂家B试剂进行检测
将上述7份标本分别于B厂家试剂进行检测,结果显示铁检测结果均正常,反应曲线均正常。查看B厂家试剂说明书,试剂成分与A厂家无区别。
分析心得同样的高免疫球蛋白血症标本,且两厂家试剂成分无区别,在使用A厂家试剂高免疫球蛋白会对铁结果影响,B厂家试剂无影响,说明A厂家试剂抗免疫球蛋白干扰能力差。如此诡异结果终于掀开面纱,一例典型的免疫球蛋白变性引起的吸光度值的改变…
编辑:小白审校:Rose
检验医学网检验医学网
白癜风又快又好的偏方白癜风诱发因素