临床检验基础知识要点七

文章来源:高免疫球蛋白血症   发布时间:2019-11-10 22:58:59   点击数:
 

尿液化学检查

一、尿液酸碱度测定

  (一)定义   尿液酸碱度是反映肾脏调节机体内环境体液酸碱平衡能力的重要指标之一,通常简称为尿液酸度。尿液酸度分两种:可滴定酸度和真正酸度。前者可用酸碱滴定法进行滴定,相当于尿液酸度总量,后者是指尿液中所有能离解的氢离子浓度,通常用pH来表示。   (二)检测方法及评价   1.试带法用pH广泛试带浸入尿液中,立即取出与标准色板比较测定,用肉眼判断出尿液的pH,或用仪器判读结果。本法操作简单,可目测或用尿液分析仪检测,是目前应用最广泛的筛检方法。但试带易吸潮变质,易影响准确性。   2.指示剂法常用的指示剂为0.4g/L溴麝香草酚蓝溶液,显示黄色为酸性尿;显示蓝色为碱性尿;显示绿色为中性尿。本法操作简单,但溴麝香草酚蓝的pH变色范围为6.0~7.6,当尿液pH偏离范围时,检测结果不准确。黄疸尿、血尿易干扰指示剂法。   此外,还有滴定法和pH计法,但操作复杂。后者可用于酸负荷试验后尿液pH检查,对于肾小管酸中毒的定位诊断、分型、鉴别诊断有一定的应用价值。   (三)质量控制   1.标本必须新鲜陈旧标本可因尿C02挥发或细菌生长使pH增高,也可因细菌和酵母菌作用,使尿中葡萄糖降解为酸和乙醇而pH减低。

  2.试带法试带应满足生理和病理尿pH的变化范围,未被酸、碱污染,未吸潮变质。   3.指示剂法一般指示剂多不易溶于水,配制指示剂溶液时,应先用少许碱液(如NaOH稀溶液)助溶后,再加蒸馏水稀释到适当浓度,以满足指示剂颜色变化范围,因为指示剂的解离质点状态与未解离质点状态呈现不同的颜色。   4.滴定法氢氧化物溶液浓度必须标准。   5.pH计法应经常校准pH计,确保仪器在正常良好状态下检测。   (四)参考值   在正常饮食条件下,晨尿多偏弱酸性,多数尿标本pH5.5~6.5,平均pH6.0。随机尿pH4.5~8.0,尿可滴定酸度为20~40mmol/24h尿。   (五)临床应用   1.生理性变化   (1)尿液pH易受食物影响:如进食含蛋白质高的食物过多或饥饿状态等,尿pH减低;而进食过多的蔬菜、水果等含碱性物质较多的食品时,尿pH增高。

  (2)进餐后尿pH增高:机体每次进餐后,尿液的pH呈一过性增高,称之为碱潮。

(3)剧烈运动、饥饿、出汗、应激状态等生理活动,夜间入睡后呼吸减慢,体内酸性代谢产物增多均可使尿液pH减低。许多药物也会影响尿液pH。尿内含有大量脓、血或细菌污染,分解尿素可使尿液碱化。

2.病理变化   (1)尿pH减低。见于:   ①酸中毒、慢性肾小球肾炎、发热、服用氯化铵等药物时。   ②代谢性疾病:如糖尿病、痛风、低血钾性碱中毒(肾小管分泌H+增强,尿酸度增高)等。

③其他:如白血病、呼吸性酸中毒。   (2)尿pH增高。见于:   ①碱中毒:如呼吸性碱中毒。   ②严重呕吐。   ③尿路感染:如膀胱炎、肾盂肾炎、变形杆菌性尿路感染,由于细菌分解尿素产生氨等。④肾小管性酸中毒:尿pH呈相对偏碱性。   

⑤应用利尿剂,进食太多蔬菜、水果等。   3.观察尿液pH变化,指导临床用药,预防肾结石的形成和复发,减轻泌尿系统微生物的感染。   二、尿液蛋白质检查   正常人尿蛋白来源正常人尿蛋白约有多种,主要有:①小相对分子质量蛋白:如微球蛋白、溶菌酶、核糖核酸酶以及免疫球蛋白Fc片段等。②大相对分子质量蛋白:如Tamm-Horsfall糖蛋白及分泌型IgA等。③中相对分子质量蛋白:如相对分子质量为4万~9万的清蛋白,占尿蛋白总量50%左右。

(一)蛋白尿定义   尿液中蛋白质超过mg/24h或超过mg/L时,蛋白定性试验呈阳性,即称为蛋白尿。   

(二)蛋白尿生成原因及机制   1.肾小球性蛋白尿   

因肾小球的损伤而引起的蛋白尿。多因肾小球受到感染、毒素、免疫、代谢等因素的损害后,引起肾小球毛细血管壁破裂,滤过膜孔径加大,通透性增强或电荷屏障作用受损,使血液中相对分子质量较小的血浆蛋白(以清蛋白为主)滤出原尿中。若损害较重时,球蛋白及其他少量大分子质量蛋白滤出也增多,超过了肾小管重吸收能力而形成蛋白尿。根据肾小球滤过膜损伤的严重程度及尿液中蛋白质的组分不同,可将其分为两类。   (1)选择性蛋白尿:主要成分是相对分子质量为4万~9万的中相对分子质量的清蛋白。相对分子质量>9万的蛋白则极少出现。尿免疫球蛋白/清蛋白的比值<0.1。尿蛋白半定量多为+++~++++。当尿蛋白定量>3.5g/24h时,称为肾病性蛋白尿,最典型的病例是肾病综合征。   

(2)非选择性蛋白尿:反映肾小球毛细管壁有严重破裂损伤。尿蛋白成分,以大和中相对分子质量蛋白质同时存在为主,尿蛋白中,免疫球蛋白/清蛋白比值>0.5,半定量为+~++++,定量在0.5~3.0g/24h之间,多见于原发性肾小球疾病(如急进性肾炎、慢性肾炎、膜性或膜增生性肾炎等)及继发性肾小球疾病(如糖尿病肾炎、红斑狼疮性肾炎等)。出现非选择性蛋白尿提示预后较差。

2.肾小管性蛋白尿   

肾小管受到感染或中毒损伤后,肾小管近曲小管段对肾小球滤过液中的小相对分子质量蛋白质重吸收能力减低,而出现以小相对分子质量蛋白为主的蛋白尿,称为肾小管性蛋白尿。单纯性肾小管性蛋白尿,尿蛋白含量较低,一般<2g/24h,定性半定量试验+~++。

肾小管性蛋白尿多见于:   ①肾小管间质病变:如间质性肾炎、肾盂肾炎、遗传性肾小管疾病如Fanconi综合征、慢性失钾性肾病等。   ②中毒性肾间质损伤:由于汞、镉、铀、砷和铋等重金属类或苯四氯化碳等有机溶剂以及卡那霉素、庆大霉素、磺胺、多黏菌素、四环素等抗生素类,可引起肾小管上皮细胞肿胀、变性与坏死,又称中毒性肾病。   ③中草药:如使用马兜铃、木通过量,也可引起高度选择性肾小管蛋白尿,此时常伴有明显管型尿。   ④器官移植排斥反应等。   3.混合性蛋白尿   指肾脏疾病时,肾小球和肾小管同时或相继受损而产生的蛋白尿,其组分与血浆蛋白相似,但各种组分所占的比例可因病变主要侵害的部位而不同,尿蛋白电泳检查有助于临床对蛋白尿组成的分析、判断及诊断。   4.溢出性蛋白尿   指血液循环中,出现了大量以中、小相对分子质量为主的异常蛋白质,如游离血红蛋白、肌红蛋白、溶菌酶等增多,经肾小球滤出后,原尿中的含量超过了肾小管重吸收最大能力,而大量出现在尿液中形成的蛋白尿。尿蛋白质定性,多为+~++。   可见于:   ①浆细胞病;   ②急性血管内溶血;   ③急性肌肉损伤;   ④其他:如急性白血病时血溶菌酶增高、严重胰腺炎时血淀粉酶增高形成的蛋白尿。   5.组织性蛋白尿   凡肾组织细胞代谢产生的蛋白质、组织破坏分解的蛋白质,以及肾脏组织炎症,或受药物等刺激泌尿道组织分泌的蛋白质等,进入尿液中形成的蛋白尿,均称为组织性蛋白尿。定性±~+,定量0.5~1.0g/24h。其组成成分多以T-H蛋白为主。   

6.其他   如生理性蛋白尿、偶然性蛋白尿、摄入性蛋白尿和妊娠性蛋白尿。   (三)检测方法及评价   1.尿蛋白定性试验为蛋白尿的过筛试验。   (1)试带法:利用pH指示剂的蛋白误差原理。本法对清蛋白较敏感,对球蛋白不敏感,仅为清蛋白的1/~1/50,且可漏检本周蛋白。尿液pH增高可产生假阳性。本法快速、简便、易于标准化,适于健康普查或临床筛检。   (2)加热乙酸法:为传统的经典方法,特异性强、干扰因素少,能同时检出清蛋白及球蛋白尿,但敏感度较低,一般在0.15g/L左右。本法能使含造影剂尿液变清,可用于鉴别试验。   (3)磺基水杨酸法:又称磺柳酸法。操作简便、反应灵敏、结果显示快,与清蛋白、球蛋白、糖蛋白和本周蛋白等均能发生反应;敏感度达0.05g/L,因而有一定的假阳性。被NCCLS作为干化学法检查尿蛋白的参考方法,并推荐为检查尿蛋白的确证试验。   2.尿蛋白定量试验检查方法有:沉淀法、比色法、比浊法、染料结合法、免疫测定法和尿蛋白电泳法等。目前染料结合法、比色法应用较广泛,免疫法及尿蛋白电泳法具有更高的灵敏度和特异性,有很好的临床应用前景。   尿蛋白检测方法的选择:对于进行现场快速检验,或初次就诊的门诊患者,采用试带法或磺基水杨酸法,基本可满足健康体检和疾病筛查的需要;在疾病确诊后需要进行疗效观察或预后判断时,则需要配合加热乙酸法,必要时需进行尿蛋白定量和特殊蛋白质分析。   (四)质量控制   1.试带法必须使用标准合格的试带,并严格按照注意事项操作(参见尿液分析仪及临床应用一章)。   2.加热乙酸法控制加酸量及盐类浓度,加酸过少、过多,导致远离蛋白质等电点时,可使阳性程度减弱。如尿液盐类浓度过低,又可致假阴性,此时可加饱和氯化钠溶液1~2滴后,再进行检查。   

3.磺基水杨酸法使用某些药物(如青霉素钾盐、复方磺胺甲噁唑、对氨基水杨酸等)及有机碘造影剂时,以及尿内含有高浓度尿酸、草酸盐或黏蛋白时,可呈假阳性反应。此时,可通过加热煮沸后浊度是否消失予以鉴别。   

4.考马斯亮蓝法尿蛋白测定应注意:①考马斯亮蓝试剂易吸附在比色杯上,每次使用后应立即用甲醇或乙醇或水加适量丙酮洗涤,并最好用专用比色杯。②试剂酸度对蛋白质测定影响较大,pH越高灵敏度越低。③考马斯亮蓝试剂必须新鲜,否则对蛋白质结合能力下降。④线性范围较窄。   5.注意方法间差异,加强质量控制用于尿蛋白定量的各种方法之间存在较大差异;应尽力做到:标本、试剂合格,操作规范,结果有可比性。   (五)参考值   定性试验:阴性。   定量试验:<0.1g/L,或<0.15g/24h。   (六)临床应用   1.生理性蛋白尿   (1)功能性蛋白尿:见于剧烈运动后、发热、寒冷刺激、精神紧张、过度兴奋等,呈混合性蛋白尿,一般为2~3天后消退。   (2)直立性蛋白尿:可见于站立时间过长、“行军性”蛋白尿等。多见于青少年,绝大多数无肾病证据。   (3)摄入性蛋白尿:输注成分血浆、清蛋白及其他蛋白制剂,或进食过多蛋白质时,尿液中可偶然被检出尿蛋白。   (4)偶然性蛋白尿:受白带、月经血、精液、前列腺液的污染,偶尔出现假性蛋白尿。   (5)老年性蛋白尿:与年龄低于60岁的人相比,老年人蛋白尿的发生率增高。这些人每隔6个月应随访检查血压等,但总体预后良好。   (6)妊娠性蛋白尿:妊娠时可有蛋白尿,但应注意随访。若无症状者,尿蛋白持续1~2g/d或伴血尿时,则预后比暂时性或体位性蛋白尿者差。   2.病理性蛋白尿病理性蛋白尿可分为   (1)肾前性蛋白尿。见于:   ①浆细胞病:如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、浆细胞白血病等。   ②血管内溶血性疾病:如阵发性睡眠性血红蛋白尿等。   ③大面积肌肉损伤:如挤压伤综合征、电灼伤、多发性肌炎、进行性肌肉萎缩等。   ④酶类增高:如急性单核细胞白血病尿溶菌酶增高,胰腺炎严重时尿淀粉酶增高等。   (2)肾性蛋白尿   1)肾小球性蛋白尿:   ①肾病综合征:蛋白尿以清蛋白为主,少量小相对分子质量蛋白,定性试验多数为+++~++++,定量试验常为3.5~10g/d,最多可达20g/d。   ②原发性肾小球肾炎:如急性肾炎、慢性肾炎、膜性肾炎、膜增生性肾炎、肾功能衰竭等。   ③继发性肾小球疾病。   糖尿病肾病:早期尿中即出现微量清蛋白,临床肾病期尿蛋白常>0.5g/d。狼疮性肾炎:轻型损害时,尿蛋白多在+~++之间,定量为0.5~2g/d。妊娠中毒症:正常妊娠时,尿蛋白可轻度增高;但妊娠中毒症者,尿蛋白多为+~++,严重时可达+++~++++,定量可>5g/d。   2)肾小管性蛋白尿:   ①肾小管间质病变:如间质性肾炎、肾盂肾炎、Fanconi综合征、肾小管性酸中毒等。   ②重金属中毒:如汞、镉、铋、砷、铀等,重金属类引起中毒性肾间质疾病。   ③药物中毒:某些抗生素如庆大霉素、卡那霉素、多黏菌素等;中草药类如马兜铃、木通等;有机溶剂如苯中毒等。   ④器官移植:如肾移植排斥反应等。   (3)肾后性蛋白尿:   ①泌尿、生殖系炎症反应:如膀胱炎、尿道炎、前列腺炎、精囊炎等。   ②泌尿系结石、结核、肿瘤等。   ③泌尿系邻近器官疾病:如急性阑尾炎、慢性盆腔炎、宫颈炎、盆腔肿瘤等,泌尿系邻近器官炎症或肿瘤刺激。   三、尿液糖检查   (一)定义正常人尿液几乎不含或仅含微量葡萄糖,一般尿糖定性试验为阴性。尿糖定性试验呈阳性的尿液称为糖尿,葡萄糖是尿糖的主要成分,偶尔亦可见乳糖、半乳糖、果糖、戊糖等。葡萄糖是否出现于尿液中,主要取决于3个因素:①血糖浓度;②肾血流量;③肾糖阈:当血糖浓度超过8.88mmol/L时,尿液中开始出现葡萄糖。把尿液中开始出现葡萄糖时的血浆葡萄糖(血糖)浓度水平,称为肾糖阈值(简称肾糖阈)。   

(二)检测方法及评价   1.班氏法(Benedict法)利用葡萄糖的还原性,是传统尿糖定性试验方法。本法是非特异性测定葡萄糖的试验,可检出多种尿糖,简便,但易受其他还原物质干扰,倾向于淘汰。   2.试带法采用葡萄糖氧化酶法。本法检测葡萄糖的特异性强、灵敏度高、简便快速,适用于自动化分析。   

3.薄层层析法操作复杂、费时、成本高,多用于临床或基础研究,临床上一般情况少用。   (三)质量控制   1.班氏法   试验前,必须首先煮沸班氏试剂,避免试剂变质。   2.试带法   ①避免假阳性:假阳性可见于尿标本容器残留强氧化性物质如漂白粉、次亚氯酸等或低比密尿等。②避免假阴性:尿液含有高浓度酮体、维生素C、阿司匹林;使用氟化钠保存尿液;标本久置,葡萄糖被细菌或细胞酶分解,可引起假阴性。   

(四)参考值   定性试验:阴性。   (五)临床应用   尿糖检查,主要是作为糖尿病的筛检和病情判断的检测指标。但尿糖检查时,应同时检测血糖,以提高诊断准确性。   1.血糖增高性糖尿分为   (1)摄入性糖尿:①摄入增多:摄入大量的糖类食品、饮料、糖液时,可引起血糖短暂性增高而导致糖尿。②输入性增多:静脉输注高渗葡萄糖溶液后,可引起尿糖增高。   (2)应激性糖尿:由于情绪激动、脑血管意外、脑出血、颅脑外伤等情况下,出现暂时性高血糖和一过性糖尿。   (3)代谢性糖尿:由于内分泌激素分泌失常,糖代谢发生紊乱引起高血糖所致。最常见的是糖尿病。   糖尿病   ①尿糖检测是糖尿病诊断、病情判断、治疗效果观察及预后的重要指标之一。②尿糖与血糖检测关系:糖尿病如并发肾小球动脉硬化症,则因肾血流量减低,肾小球滤过率减低,肾糖阈增高,此时尽管血糖已超过一般的肾糖阈,尿糖检查仍可呈阴性;轻型糖尿病患者,其空腹血糖含量可能正常或轻度增高,尿糖检查亦可呈阴性,但进餐后2小时,由于负载增高,可出现血糖增高,尿糖阳性。   

因此,疑糖尿病时,应该同时检查血糖、尿糖、餐后2小时尿糖,还应该进一步做糖耐量试验,以明确糖尿病的诊断;对于糖尿病患者而言,尿糖检测无痛苦且廉价,因此,对于以饮食控制尿糖的患者,尿糖检查较为适用,但对胰岛素依赖的患者,尿糖检测结果与血糖的对应性较差,因而,宜用血糖监测患者的治疗。   

(4)内分泌性糖尿:①甲状腺功能亢进;②肢端肥大症;③嗜铬细胞瘤;④Cushing(库欣)综合征。   2.血糖正常性糖尿   又称肾性糖尿。出现糖尿的原因是由于肾小管对滤过液中葡萄糖重吸收能力减低,肾糖阈减低所致的糖尿。如:   ①家族肾性糖尿:如Fanconi综合征患者,空腹血糖、糖耐量试验均正常,但由于先天性近曲小管对糖的重吸收功能缺损,空腹尿糖则为阳性。   ②新生儿糖尿:因肾小管对葡萄糖重吸收功能还不完善所致。   ③后天获得性肾性糖尿:可见于慢性肾炎、肾病综合征及伴有肾小管损伤者。   ④妊娠期或哺乳期妇女:因细胞外液容量增高,肾小球滤过率增高而近曲小管的重吸收能力受到抑制,使肾糖阈减低,出现糖尿;但如出现持久且强阳性尿糖时,应进一步检查原因。   3.其他糖尿   血液中除了葡萄糖外,其他糖类有:乳糖、半乳糖、果糖、戊糖、蔗糖等。如果进食过多或受遗传因素影响,体内糖代谢失调后,亦可使血液中浓度增高,易出现相应的糖尿。   四、尿液酮体检查   (一)定义   尿酮体(KET)是尿液中乙酰乙酸(占20%)、β-羟丁酸(占78%)及丙酮(占2%)的总称。酮体是机体脂肪氧化代谢产生的中间代谢产物,当糖代谢发生障碍、脂肪分解增高,酮体产生速度超过机体组织利用速度时,可出现酮血症,酮体血浓度一旦超过肾阈值,就可产生酮尿。   (二)检测方法及评价   1.试带法   基于传统的湿化学亚硝基铁氰化钠法而设计,是目前临床上最常用的尿酮体筛检方法。检测过程简易快速,尤其适合于床边检验。应注意不同试带对丙酮和乙酰乙酸的灵敏度不一。   

2.湿化学法   (1)Rothera法:在碱性条件下,亚硝基铁氰化钠可与尿中的乙酰乙酸、丙酮起反应呈现紫色,但不与β-羟丁酸起反应。   (2)Gerhardt法:高铁离子(Fe3+)与乙酰乙酸的烯醇式基团发生螯合,形成酒红色复合物。   3.片剂法   基本原理为亚硝基铁氰化钠法。   (三)质量控制细菌在体内外可导致乙酰乙酸的丢失;室温保存,丙酮易丢失,密闭冷藏可避免挥发,但试验时标本应置于室温中恢复温度后再检测。   (四)参考值   定性:阴性。定量:酮体(以丙酮计)~mg/L;乙酰乙酸≤20mg/L。   (五)临床意义   尿酮体检查主要用于糖代谢障碍和脂肪不完全氧化疾病或状态的诊断,强阳性试验结果具有医学决定价值。   

1.糖尿病酮症酸中毒   ①早期诊断:糖尿病由于未控制或治疗不当,血酮体增高而引起酮症,出现酸中毒或昏迷。尿酮体检查有助于糖尿病酮症酸中毒早期诊断(尿酮体阳性),并能与低血糖、心脑疾病乳酸中毒或高血糖高渗透性糖尿病昏迷相区别(尿酮体阴性)。但应注意,当患者肾功能严重损伤肾阈值增高时,尿酮体排出反而减低,甚至完全消失。故当临床高度怀疑为糖尿病酮症酸中毒时,即使尿酮体阴性也不能排除诊断,应进一步检查血酮体等。

②治疗监测:糖尿病酮症酸中毒早期病例中,主要酮体成分是β-羟丁酸(一般试带法无法测定),而乙酰乙酸很少或缺乏,此时测得结果可导致对总酮体量估计不足。当糖尿病酮症酸中毒症状缓解之后,β-羟丁酸转变为乙酰乙酸,反而使乙酰乙酸含量比急性期早期增高,此时易造成对病情估计过重。因此,必须注意病程发展,并与临床医生共同分析测定结果。当多次检测尿酮体均为阴性时,可视为疾病好转。   ③新生儿:出现尿酮体强阳性,应怀疑为遗传性疾病。   2.非糖尿病性酮症者如应激状态、剧烈运动、饥饿、禁食过久、饮食缺乏糖类或为高脂肪,感染性疾病如肺炎、伤寒、败血症、结核等发热期,严重腹泻、呕吐包括妊娠反应性、全身麻醉后等均可出现酮尿。   3.中毒如氯仿、乙醚麻醉后、磷中毒等。服用双胍类降糖药(如苯乙双胍)等,由于药物抑制细胞呼吸,可出现血糖减低而尿酮体阳性的现象。   

五、尿液胆红素检查   (一)概述   血浆胆红素有3种:未结合胆红素(UCB)、结合胆红素(CB)和δ-胆红素。成人每日平均产生~mg胆红素,其中,约75%来自衰老红细胞中血红蛋白的分解,另25%主要来自骨髓内未成熟红细胞的分解及其他非血红蛋白的血红素分解产物。UCB不溶于水,在血中与蛋白质结合不能通过肾小球滤膜。UCB入肝后在葡萄糖醛酸转移酶作用下形成胆红素葡萄糖醛酸,即为CB。CB相对分子质量小,溶解度髙,可通过肾小球滤膜由尿中排出。   δ-胆红素的反应性与结合胆红素相似,但它是未结合胆红素与清蛋白通过非酶促反应形成的共价结合物,通常在血浆中含量很低。当血中CB增高,超过肾阈值时,结合胆红素即从尿中排出,尿胆红素试验可呈阳性反应。   (二)检测方法及评价   1.重氮法   

干化学试带法多用此原理,操作简单,且可用于尿自动化分析仪,目前多用此法作定性筛检试验,如果反应不典型,应进一步分析鉴定。在尿液pH较低时,某些药物或其代谢产物如吡啶和依托度酸可引起假阳性反应;尿兰母产生橘红色或红色而干扰结果。维生素C浓度达1.42mmol/L和亚硝酸盐存在时,可抑制重氮反应而假阴性。   

2.氧化法   Smith碘环法最为简单,但灵敏度低,目前已很少使用;Harrison法操作稍繁,但灵敏度较高。   (三)质量控制   胆红素在阳光照射下易转变为胆绿素,因此检测时应使用新鲜尿液标本。为避光,宜用棕色容器收集标本。维生素C、亚硝酸盐和某些药物,可引起假阴性结果。   (四)参考值定性:阴性。   (五)临床意义   尿胆红素检测主要用于黄疸的诊断和黄疸类型的鉴别诊断。   1.胆汁淤积性黄疸   又称阻塞性黄疸,因胆汁淤积使肝胆管内压增高,导致毛细胆管破裂,结合胆红素不能排入肠道而逆流入血由尿中排出,故尿胆红素阳性。可见于各种原因引起的肝内或肝外、完全或不完全梗阻,如胆石症、胆管癌、胰头癌、原发性胆汁性肝硬化、门脉周围炎、纤维化及药物所致胆汁瘀滞等。   2.肝细胞性黄疸   

见于各种使肝细胞广泛损害的疾病,如急性黄疸性肝炎、病毒性肝炎、肝硬化、中毒性肝炎、败血症等。因肝细胞损伤,致使肝细胞对胆红素的摄取、结合、排泄功能受损。肝细胞摄取血浆中未结合胆红素能力减低,使UCB在血中浓度增高,但受损的肝细胞仍能将UCB转变为CB。在病毒性肝炎黄疸前期,当血清总胆红素增高或黄疸不明显时,尿胆红素阳性为最早出现阳性的检测指标之一,阳性率达86%,因此尿胆红素的检测有利于病毒性肝炎的早期诊断。   3.溶血性黄疸   由于大量红细胞的破坏,形成大量的UCB,超过肝细胞的摄取、结合、排泄能力;同时,由于溶血性造成的贫血缺氧和红细胞破坏产物的毒性作用,削弱了肝细胞对胆红素的代谢功能,使UCB在血中潴留而引起黄疸。但肝细胞将UCB转变为CB,并经胆管排泄均正常,因而血液中并无CB存在,故尿胆红素阴性。溶血性黄疸可见于各种溶血性疾病。   4.先天性高胆红素血症如:   ①Dubin-Johnson综合征;   ②Rotor综合征;   ③Gilbert综合征;   ④Crigler-Najjar综合征。   六、尿液尿胆原和尿胆素检查   (一)概述   结合胆红素排入肠腔转化为尿胆原,从粪便中排出为粪胆原。大部分UBG从肠道重吸收经肝转化为结合胆红素再排入肠腔,小部分UBG从肾小球滤过或肾小管排出后即为尿UBG.无色UBG经空气氧化及光线照射后转变成黄色的尿胆素。尿胆红素、UBG及尿胆素,俗称尿三胆。由于送检的标本多为新鲜尿标本,UBG尚未氧化成尿胆素,故一般检查胆红素和UBG,又俗称尿二胆。   

(二)检测方法   1.尿胆原   ①湿化学Ehrlich法:UBG在酸性溶液中,与对二甲氨基苯甲醛反应,生成樱红色化合物。   ②试带法:检测原理基于Ehrlich法。UBG检测已成为尿分析仪试带法分析项目组合之一,用于疾病的尿筛检。采用Ehrlich醛反应方法,可用于定性和定量。   2.尿胆素用湿化学Schleisinger法。   (三)参考值尿胆原定性:阴性或弱阳性(1:20稀释后阴性)。尿胆素定性:阴性。   (四)临床意义   UBG检查结合血清胆红素、尿胆红素和粪胆原等检查,主要用于黄疸的诊断和鉴别诊断。   1.溶血性黄疸   因体内有大量红细胞破坏,使血中UCB含量增高,导致肝细胞代偿性产生更多的CB,从胆道排入肠道也增高,致UBG增高,粪胆原随之增高,粪色加深。尿液UBG呈明显强阳性,尿胆素阳性。可见于各种先天性或后天获得性溶血性疾病,如珠蛋白生成障碍性贫血、遗传性球性红细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血、新生儿溶血、输血后溶血、蚕豆病、蛇毒、阵发性睡眠性血红蛋白尿等,也可见于大面积烧伤等。   2.肝细胞性黄疸   因肝功能障碍,使胆素原肠-肝循环受损,UBG可轻度或明显增高,尿胆素阳性。在反映肝细胞损伤方面,UBG比尿胆红素更灵敏,是早期发现肝炎的简易有效的方法。   3.梗阻性黄疸   因无胆红素排入肠腔,粪便呈白陶土色,尿胆原阴性,尿胆素亦阴性。   

对黄疸患者,应首先确定高胆红素的类型,再确定黄疸的病因。从实验室检查入手,结合血清胆红素定量、尿胆红素、尿胆原、尿液和粪便颜色,对溶血性黄疸的诊断无太大困难。其典型特征是:血清UCB增高,CB正常,尿色深黄,粪便颜色加深,尿胆原强阳性,尿胆红素阴性,尿隐血阳性。

但肝细胞性与胆汁淤积性黄疸在鉴别上常有一定难度。尿胆红素阳性是其共同特征,某些病例可从尿胆原的检查上加以区别。如胆总管癌、胰头癌和胆管炎所引起的完全或部分阻塞性黄疸,因胆汁排入肠腔障碍,致尿胆原生成减低,尿胆原减低或阴性。当然,在临床上还需结合影像诊断检查和其他辅助检查。   七、尿血红蛋白检查   (一)概述   血红蛋白为含血红素的色素蛋白,正常人血浆中含有50mg/L游离血红蛋白,尿中无游离血红蛋白。当有血管内溶血时,红细胞破坏,血红蛋白释放入血液形成血红蛋白血症。若血红蛋白超过结合珠蛋白所能结合的量,则血浆存在大量游离血红蛋白,当其量超过0mg/L时,血红蛋白可随尿液排出。其特点为外观呈浓茶色、红葡萄酒色或酱油色,隐血试验阳性。   

(二)检测方法及评价   1.湿化学法   常用邻联甲苯胺法、氨基比林(匹拉米洞)法等,操作简单,但试剂稳定性差,特异性较低;尿液中混入铁盐、硝酸、铜、锌、碘化物等均可使结果呈假阳性,尿液中含有过氧化物酶或其他对热不稳定酶也可呈假阳性。   

2.试带法   基本克服了湿化学法试剂不稳定的弱点,但尿液中含有对热不稳定酶、尿液被氧化剂污染或尿路感染时某些细菌产生过氧化物酶,可致结果呈假阳性;大剂量的维生素C或其他还原物质导致假阴性;甲醛可使反应假阴性,大量亚硝酸盐则可延迟反应。试带法除与游离血红蛋白反应外,也与完整的红细胞反应,但在高蛋白、高比密尿液中,RBC不溶解,试带灵敏度减低。   

3.胶体金单克隆抗体法   灵敏度高、特异性强、操作快速、使用方便,基本克服了化学法试带法的缺点。   (三)质量控制   标本应新鲜。湿化学法所用试剂必须准确、可靠,3%过氧化氢易变质、失效,应新鲜配制。为防止假阳性,可将尿液煮沸2分钟,破坏尿中白细胞过氧化物酶或其他易热性触酶。   

(四)参考值阴性。   (五)临床意义   尿血红蛋白测定有助于血管内溶血疾病的诊断。引起血管内溶血的主要疾病有:   

1.红细胞破坏如心脏瓣膜修复术后患者、大面积烧伤、剧烈运动、急行军、严重的肌肉外伤和血管组织损伤。

2.生物因素疟疾感染、梭状芽胞杆菌中毒。

3.红细胞膜缺陷因6-磷酸葡萄糖脱氢酶缺乏如食用蚕豆,服用药物伯氨喹啉、乙酰苯胺、磺胺、呋喃坦啶、非那西汀后。

4.不稳定血红蛋白疾病接触氧化性药物后。

5.免疫因素溶血性尿毒症综合征、血栓性血小板减低性紫癜、血型不合输血、温抗体、冷抗体如阵发性寒冷性血红蛋白尿症、阵发性睡眠性血红蛋白尿症及药物诱导的半抗原型(青霉素、甲基多巴型、奎尼丁)自身免疫性溶血性贫血。   八、尿液本周蛋白检查   (一)概述   本周蛋白(BJP)是游离的免疫球蛋白轻链,能自由通过肾小球滤过膜,当浓度增高超过近曲小管重吸收的极限时,可自尿中排出,即本周蛋白尿。BJP在pH4.9±0.1条件下,加热至40~60℃时可发生凝固,温度升至90~℃时可再溶解,而温度减低至56℃左右,又可重新凝固,故又称为凝溶蛋白,此为BJP的重要特性之一。   BJP主要通过两种机制损伤肾功能:当BJP通过肾排泄时,BJP可在肾小管内沉淀,进而引起肾小管阻塞,抑制肾小管对其他蛋白成分的重吸收,损害近曲、远曲小管;其次,κ轻链相对分子质量小,且具有肾毒性,可直接损害肾小管细胞。   (二)检测方法及评价

1.热沉淀-溶解法   基于BJP在56℃凝固,℃溶解的特性。本法灵敏度不高,致使假阴性率高。

2.对-甲苯磺酸法   

基于对-甲苯磺酸法能沉淀相对分子质量较小的BJP,而与相对分子质量较大的清蛋白和球蛋白不起反应的原理而测定。本法操作简便、灵敏度高,是较敏感的筛检试验方法。

3.蛋白电泳法经乙酸纤维素膜电泳,BJP可在α2至γ球蛋白区带间出现“M”带。   

4.免疫电泳   样品用量少、分辨率高、特异性强。

5.免疫固定电泳

比区带电泳和免疫电泳更敏感。

6.免疫速率散射浊度法

测试速度快、灵敏度高、精确度高、稳定好,是目前免疫学分析中比较先进的方法。   (三)参考值阴性。   (四)临床意义   1.多发性骨髓瘤患者尿中可出现BJP。99%多发性骨髓瘤患者在诊断时有血清M-蛋白或尿M-蛋白。早期尿BJP可呈间歇性排出,50%病例每日大于4g,最多达90g。   2.巨球蛋白血症80%的患者尿中有单克隆轻链。   3.原发性淀粉样变性70%以上的患者血和尿中发现单克隆蛋白,89%患者诊断时血或尿中有单克隆蛋白。   4.其他疾病   μ重链病2/3病例有BJP尿;恶性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、转移癌、慢性肾炎、肾盂肾炎、肾癌等患者尿中也偶见BJP。20%“良性”单克隆免疫球蛋白血症病例可查出BJP,但尿中含量低,多数小于60mg/L;   一些患者有稳定的血清M蛋白和尿BJP,长达15年也未发展为多发性骨髓瘤或有关疾患。   九、尿液微量清蛋白测定   (一)概述   微量清蛋白尿是指尿液中清蛋白超过正常水平、但低于常规试带法可检出的范围。微量清蛋白尿是早期糖尿病肾病的临床主要征象,其概念主要用以区别传统的临床蛋白尿。   

(二)检测方法及评价   尿液微量清蛋白尿,用磺基水杨酸法、加热乙酸法及试带法基本不能检出,因而多采用免疫学方法,如放射免疫法、酶免疫法、免疫浊度法等。   微量清蛋白标本收集及报告方式有3种①定时尿法:计算出单位时间内的排出率(μg/min或mg/24h)。②随机尿法:用肌酐比值报告排出率(mg/mmolCr或mg/gCr)。③晨尿法:报告每升尿排出量(mg/L)。推荐以24小时尿清蛋白排泄总量,即尿清蛋白排泄率(UAE)表示。   

(三)参考值   成人:(1.27±0.78)mg/mmolCr或(11.21±6.93)mg/gCr。   AER:5~30mg/24h(AER为尿液白蛋白排泄率)。   

(四)临床意义   尿微量清蛋白检测主要用于早期肾损害的诊断,尤其当尿清蛋白排泄率持续超过20μg/min尿,常作为糖尿病、系统性红斑狼疮(SLE)等全身性疾病早期肾损害的敏感指标。微量清蛋白尿还见于:   ①大多数肾小球疾病、狼疮性肾炎、肾小管间质疾病等。   ②妊娠子痫前期、自身免疫性疾病、多发性骨髓瘤的肾功能衰竭、充血性心力衰竭、肝癌、肝硬化等。   ③高血压、肥胖、高脂血症、吸烟、剧烈运动与饮酒等。   十、尿液蛋白电泳   (一)检测方法及评价尿蛋白电泳常用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE),亦称尿蛋白SDS盘状电泳。本法是目前分析蛋白质亚基组成和测定其相对分子质量的最好方法。   

(二)参考值   各相对分子质量的尿蛋白均显示微量蛋白区带,但以清蛋白区带为主。   (三)临床意义尿蛋白电泳主要用于蛋白尿的分型。   1.低相对分子质量蛋白见于以肾小管损害为主的疾病,如急性肾盂肾炎、肾小管性酸中毒、慢性间质性肾炎早期、重金属及药物引起肾损害等。   2.中及高相对分子质量蛋白见于以肾小球损害为主的疾病,如各类原发性、继发性肾小球肾炎、肾病综合征等。   3.混合性蛋白尿见于整个肾单位受损的病理情况,如慢性肾炎晚期、严重间质性肾炎累及肾小球,以及各种病因引起的慢性肾衰竭等。   十一、尿液肌红蛋白检查   (一)概述肌红蛋白(Mb)是横纹肌、心肌细胞内的一种含亚铁血红素单链的蛋白质,其结构及特性与血红蛋白相似。当肌肉组织受损伤时,Mb可大量释放至细胞外进入血液循环,因其相对分子质量较小可迅速通过肾小球滤过而由肾脏排出。肌红蛋白尿可用隐血试验法、80%饱和硫酸铵法进行检测。   (二)参考值定性:阴性。   (三)临床意义   Mb尿见于:①阵发性肌红蛋白尿,易见于剧烈运动后。②创伤。③组织局部缺血:心肌梗死早期、动脉阻塞缺血。④代谢性Mb尿:酒精中毒,砷化氢、一氧化碳中毒,巴比妥中毒,肌糖原积累等。⑤原发性肌肉疾病:皮肌炎、多发性肌炎、肌肉营养不良等。   (四)检测方法及评价   1.隐血试验(OBT)法Mb具有过氧化物酶样活性,能用尿隐血试验方法检出。   2.80%饱和硫酸铵法在80%饱和硫酸铵浓度下,Mb溶解,而Hb和其他蛋白沉淀。故在尿液中加入试剂分离Mb,再进行隐血试验,若阳性,则为Mb尿。本法操作较烦琐,灵敏度较差。   3.单克隆抗体免疫法是最敏感特异的方法,既可作为确证实验又可进行尿中肌红蛋白定量分析,尤其对急性心肌梗死的肌红蛋白尿检查有重要临床价值。   十二、尿液β2-微球蛋白测定   (一)概述   β2-微球蛋白(β2-M)是一种相对分子质量仅、含个氨基酸和1个二硫键的蛋白质,是体内除成熟红细胞和胎盘滋养层细胞外、所有细胞特别是淋巴细胞和肿瘤细胞膜上人类白细胞抗原的轻链蛋白组分,因电泳时出现于β2区带而得名。因其相对分子质量小且不和血浆蛋白结合,可自由地经肾小球滤入原尿,其中99.9%由近端肾小管以胞饮形式重吸收,并在肾小管上皮细胞中分解破坏,因此,仅有微量β2-M自尿中排出。   β2-M为肾小管性蛋白尿,用试带法筛检常为阴性,用加热乙酸法可为阳性。可用放射免疫法、酶免疫法、特定蛋白检测仪法进行定量测定。   (二)参考值<0.2mg/L。   (三)临床意义   尿β2-M检测主要用于评估肾脏早期损伤时肾小球和近端肾小管功能。   尿β2-M增高见于:①肾小管-间质性疾病、药物或毒物(如庆大霉素、卡那霉素、汞、镉、铬、金制剂等的肾毒性)所致早期肾小管损伤。②肾移植术后:若持续出现尿β2-M增高,表明排斥反应未得到有效控制。   (四)检测方法、评价及质量控制β2-M为肾小管性蛋白尿,用试带法筛检常为阴性,用加热乙酸法可为阳性。定量测定可用下列方法:   1.特定蛋白检测仪法采用速率散射比浊法原理。检测速度快,灵敏度、精确度高,稳定性好。   2.酶联免疫吸附法灵敏度和特异性高。测定简单,但受酶活性、温度、测定系统PH、离子强度等影响。   3.放射免疫法灵敏度、精密度、准确度高,特异性强。但核素放射性对人体有一定危害性,必须加以防护。   质量控制   1.标本处理β2-M在pH5以下的酸性尿中极易分解破坏,故尿液标本收集后应及时测定。若需贮存批量检测,应将尿液调节至PH6.5~7.0,冷冻保存。   2.试剂要妥善保管每批测定应有合格质控品。   十三、尿液人绒毛膜促性腺激素检查   (一)概述   人绒毛膜促性腺激素(hCG),是由胎盘合体滋养细胞分泌的一种具有促进性腺发育的糖蛋白激素,其对促性腺激素受体具有高度的亲和性。hCG存在于孕妇的血液、尿液、初乳、羊水和胎儿体内。   

在受精后第6天受精卵滋养层形成时,开始分泌微量的hCG;受精卵着床后,采用特异性β-hCG抗血清能在母体血液中检测出hCG。在妊娠早期hCG分泌量增高极快,1.7~2.Od即可增高1倍,至妊娠8~10周时血清浓度达到高峰,持续1~2周后迅速减低,妊娠晚期血清hCG浓度仅为峰值的10%,持续至分娩。   分娩后若无胎盘残留,约于产后2周内消失。hCG是唯一不随胎盘重量增加而分泌增多的胎盘激素,分泌后直接进入母血,几乎不进入胎血循环。hCG可通过孕妇血液循环而排泄到尿液中,血清hCG浓度略高于尿液,且呈平行关系。   

hCG是由两个独立的非共价键相连的肽链(α亚基和β亚基)组成的糖蛋白激素,单个亚基不具有生物学活性,当其连接成完整的化合物时才具有活性。hCGα亚基的氨基酸数量及其排列顺序与卵泡刺激素(FSH)、黄体生长激素(LH)、促甲状腺激素(TSH)的亚基几乎相同,故hCGα亚基抗体均能与FSH、LH、TSH的α亚基发生交叉反应。hCGβ亚基羧基端最后的28~32个氨基酸为其所特有,不存在于其他糖蛋白激素中,从而决定了其生物学活性及免疫学的高度特异性。因此,临床上均采用高效的抗hCGβ亚基单克隆抗体进行特异性hCG检查。近年来,也采用抗β-hCG羧基末端肽单克隆抗体,以进一步提高hCG检查的灵敏度和特异性。   

(二)检测方法和评价   检测hCG的方法很多,目前临床上主要采用免疫学方法,如ELISA法、单克隆抗体胶体金试验、电化学发光法、放射免疫试验、检孕卡法、胶乳凝集抑制试验、血凝抑制试验等。免疫学方法操作简单、快速,灵敏度高,其检测手段不断更新,正向着特异、快速、简便、敏感、普及的方向发展。   除以上检测方法外,hCG检测方法还有斑点免疫层析法、免疫化学发光法,前者简便易行,后者灵敏度高,但尚未普及。另外,生物学试验是早期检查hCG的主要方法。如果操作规范,试验的准确率可达98%以上,假阳性和假阴性很少。但试验方法繁琐,不适合大批量标本检测,目前已淘汰。   (三)质量控制   1.标本采集与处理   宜采集首次晨尿(中段尿)ml,离心取上清液用于检查。若为蛋白尿、血红蛋白尿,应加热煮沸3分钟后,离心取上清液检查。不宜使用严重的血尿、菌尿标本。   2.检验过程   每批试验均应设定阳性对照和阴性对照。   

3.假阳性   尿中LH、FSH、TSH等,可与hCG产生试验的交叉反应,呈现假阳性。虽然,正常女性尿中LH含量很少,对hCG检查影响不大,但更年期妇女,排卵期、双侧卵巢切除的患者,尿液LH含量增高,可影响hCG检查。为避免假阳性,可:①尽量采用单克隆抗体二点酶免疫法,减低交叉反应。②应在排卵期或排卵后3天,留尿检查。③对双侧卵巢切除的患者,可肌注丙酸睾丸酮,使LH下降,再留尿检查。   (四)参考值   定性:阴性。定量:<25IU/L。   (五)临床意义   1.早期妊娠诊断   妊娠后尿液hCG增高,一般妊娠后35~40天时,hCG为ng/L以上;60~70天出现高峰,hCG可达6.4~25.6μg/L,常用的hCG检查方法即能显示阳性结果,单克隆抗体二点酶免疫法在受精卵着床后5~7天即能检测出hCG。对于一般的早期妊娠诊断,可选择一般灵敏度和准确性的试验。但对于人工授精或药物促排卵的患者,则需要更早期作出妊娠诊断,以便加强监护。因此,需选择灵敏度、准确性和特异性更高的试验。   2.流产诊断和监察   ①先兆流产:   尿液hCG仍维持在高水平一般不会发生难免流产,如hCG在ng/L以下,并逐渐减低,则有流产或死胎的可能。当hCG降至48ng/L以下则难免流产。在保胎治疗过程中,如hCG不断增高,说明保胎有效。如果hCG持续减低,说明保胎无效,不必再继续保胎治疗,应尽早处理,以免死胎滞留过久而发生宫内感染。   

②不全流产:不全流产时,宫腔内尚有残留的胎盘组织,hCG检查仍可呈阳性;完全流产或死胎时hCG由阳性转为阴性。因此,检查hCG可作为保胎治疗和判断流产的参考依据。   3.异位妊娠的诊断   异位妊娠时,只有60%~80%患者hCG呈阳性,但hCG阴性者仍不能完全排除异位妊娠。50%异位妊娠的患者在阴道流血3天后,hCG仍可呈阳性。由于异位妊娠的hCG值较正常妊娠时低,因此,临床检查时应选择特异性、灵敏度高的方法。如果hCG不是每2天成倍增长,超声影像检查无宫内妊娠征象,应高度怀疑异位妊娠。hCG低于8ng/L时,很少发生异位妊娠破裂。因此,测定hCG有助于制订治疗方案。   4.妊娠滋养细胞疾病的诊断与病情观察   ①妊娠滋养细胞疾病患者,hCG浓度是正常妊娠妇女的多倍,当子宫达到或超过12周妊娠大小,hCG值仍维持在高峰水平而不减低时,提示滋养细胞疾病。   ②正常妊娠时,hCG峰值在停经后60~70天,可能与葡萄胎发病时间同期,而造成诊断困难。若连续测定hCG或与B超检查同时进行,即可作为鉴别。   ③葡萄胎清除后12~16周,hCG转为阴性;若hCG减低缓慢或减低后又上升,或12~16周后仍未转为阴性者,则提示有妊娠滋养细胞肿瘤的可能,应给予预防性化学疗法。   ④妊娠滋养细胞肿瘤患者术后3周,hCG应小于4ng/L,8~12周呈阴性;如hCG不减低或不转阴性,提示可能有残留病灶,应定期检查,以预防复发。   5.其他   畸胎瘤、睾丸间质细胞癌、肺癌、胃癌、肝癌、卵巢癌、子宫颈癌等患者血液和尿液中hCG也明显增高。当hCG作为肿瘤标志物应用时,必须结合临床表现和其他检查结果综合分析才能有意义。   十四、尿液Tamm-Horsfall蛋白测定   Tamm-Horsfail蛋白(THP)为尿中黏蛋白的一种,经免疫荧光与免疫酶电镜证实它是由Henle袢升支与远曲小管的上皮细胞内高尔基复合体产生,是一种肾特异性蛋白质。   THP为管型的主要基质成分。当机体炎症、自身免疫性疾病、尿路梗阻性疾病等引起肾脏实质损伤时,THP可沉着于肾间质并刺激机体产生相应的自身抗体。   

临床意义:   1.作为远端肾小管病变定位标志物   THP在尿中含量增高提示远端肾小管各种原因的病变、THP覆盖层破坏和刺激分泌增高。可见于上尿路炎症、感染、梗阻,自身免疫性疾病、药物毒性、金属铜和镉中毒等所引起的肾小管-间质性炎。尿THP一过性增高,可见于重铬酸钾中毒和肾移植后急性排斥反应期。   2.THP持续维持较高水平提示易于形成尿结石。尿中THP测定有助于判断泌尿道结石患者体外震波碎石治疗效果。   3.用于泌尿系统结石形成机制的研究。   十五、尿液α1-微球蛋白测定   α1-微球蛋白(α1-M)主要由肝细胞和淋巴细胞产生,广泛分布于体液及淋巴细胞膜表面。   血浆中α1-M以两种形式存在,游离型或与IgG、清蛋白结合型。结合型α1-M不能通过肾小球滤过膜。游离型α1-M可自由通过肾小球,但约99%被近曲小管上皮细胞以胞饮形式重吸收并分解,故仅微量α1-M可从尿中排泄。   临床意义:   1.尿α1-M增高   是反映和评价各种原因包括肾移植后排斥反应所致早期近端肾小管功能损伤的特异、灵敏指标。与β2-M相比较,α1-M不受恶性肿瘤的影响,酸性尿中不会出现假阴性,故结果更为可靠。   2.评估肾小球滤过功能   血清和尿α1-M都增高,表明肾小球滤过功能和肾小管重吸收功能均受损,故测定血清α1-M比检测血肌酐或β2-M在反映肾小球滤过功能和肾小管重吸收功能上更灵敏。   

十六、尿液纤维蛋白降解产物检查   纤维蛋白或纤维蛋白原在纤维蛋白溶酶作用下产生纤维蛋白降解产物(FDP)。正常人尿液中无FDP。检测尿液FDP的临床意义主要有:①原发性肾小球疾病时,尿FDP阳性并进行性增高,提示肾小球内有局部凝血、微血栓形成和纤溶变化。②弥散性血管内凝血、原发性纤溶性疾病、泌尿系统感染、肾移植排斥反应、肾肿瘤等也可见尿液FDP含量增高。   

十七、尿乳糜液和脂肪检查   (一)概述   尿液中混有淋巴液而呈稀牛奶状称乳糜尿,若同时混有血液称乳糜血尿;尿液中出现脂肪小滴则称脂肪尿。   

乳糜尿形成机制:从肠道吸收的乳糜液未经正常的淋巴道引流入血而逆流至泌尿系淋巴管中,引起该处淋巴管内压力增高、曲张破裂,乳糜液流入尿中所致。乳糜尿主要含卵磷脂、胆固醇、脂肪酸盐及少量纤维蛋白原、清蛋白等。若合并泌尿道感染,则可出现乳糜脓尿。   (二)检测方法及评价   1.离心沉淀法   简便,实用;可初步区分乳糜尿、脓尿、高浓度结晶尿。   2.有机溶剂抽提法   用乙醚抽提尿液后,如乳浊程度明显减轻或变为澄清可确诊为乳糜尿;将乙醚提取物经苏丹Ⅲ染色、置镜下观察,如见大小不等、橘红色脂肪球为乙醚试验阳性。   

(三)质量控制   1.有机溶剂抽提法可分为萃取、蒸发、染色及显微镜下观察4个步骤。   2.注意鉴别脓尿尿沉渣镜检可见大量白细胞;严重结晶尿:加热加酸或加碱后浑浊消失。   3.乳糜微粒如未发生球状结合,显微镜下不能见到;中性脂肪小滴因有折光性可于镜下发现。   4.本试验阳性时应注意在尿沉渣中找微丝蚴。   

(四)参考值定性:阴性。   (五)临床意义   1.临床累及淋巴循环疾病的辅助诊断   如先天性淋巴管畸形;腹腔结核、肿瘤压迫或阻塞腹腔淋巴管或胸导管;胸腹创伤或手术损伤腹腔淋巴管或胸导管。   2.丝虫病诊断。   3.其他如过度疲劳、妊娠及分娩后、糖尿病脂血症、肾盂肾炎、包虫病、疟疾等。   十八、其他化学物质检查   (一)尿液免疫球蛋白、补体C3   参考值IgG、IgA、IgM、C3:阴性。临床意义:①尿液C3及IgG、IgM阳性,提示非选择性蛋白尿。②微小病变型肾炎及肾小管疾病,尿液内C3及IgG、IgM多为阴性。③尿IgM阳性,提示肾小球滤过膜损害严重、治疗效果及预后差。   (二)尿酶   1.溶菌酶   

主要来自单核细胞和中性粒细胞,可从肾小球基底膜滤出,但90%以上被肾小管重吸收,因而尿液中很少或无溶菌酶。测定尿液内的溶菌酶主要有助于判断肾小管的功能:①肾小管炎症、中毒时,尿液溶菌酶增高,可作为鉴别肾小管与肾小球病变的标志之一;②作为肾移植排异反应观察的指标;③作为判断急性肾小管坏死预后的指标;④急性单核细胞白血病化疗后尿溶菌酶增高。   2.尿N-乙酰β-D-氨基葡萄糖酐酶(NAG)   NAG广泛存在于各组织的溶酶体中,近端肾小管上皮细胞中含量特别丰富,正常情况下,血清中的NAG不能通过肾小球滤过膜,因而NAG是肾小管功能损害最敏感的指标之一。NAG增高可见于各种肾病,因而特异性较差,如缺血或中毒引起的肾小管性肾炎、肾移植排斥、急性肾小球肾炎、梗阻性肾病、急性肾盂肾炎或慢性肾盂肾炎的活动期等。下尿路感染时尿NAG正常。   

3.尿淀粉酶(AMY)   淀粉酶主要来源于胰腺和腮腺,人血清淀粉酶易通过肾小球滤膜而出现于尿中。测定尿液淀粉酶的临床意义主要有:①急性胰腺炎:尿液淀粉酶活性一般于发病12~24小时开始增高,比血清淀粉酶迟6~10小时。但由于肾脏对淀粉酶的清除率增强,尿淀粉酶活性可高于血清一倍以上,多数在持续3~10天后恢复正常。②慢性胰腺炎:血清和尿淀粉酶活性一般不增高,但如急性发作时可有中等程度的增高。③其他疾病:任何原因所致的胰腺管阻塞,如胰腺癌、胰腺损伤、急性胆囊炎等,均可使血和尿淀粉酶活性增高。   (三)尿氨基酸   1.胱氨酸尿   胱氨酸尿症是一种先天性、家族性、遗传性常染色体隐性代谢疾病,反复发生结石、尿路梗阻合并尿路感染;严重者可形成肾盂积水、梗阻性肾病,最后导致肾功能衰竭。   2.苯丙酮尿   为较常见的先天性常染色体隐性遗传性氨基酸代谢紊乱疾病。苯丙酮酸尿症患者,由于肝内苯丙氨酸羟化酶缺乏或不足,不能使苯丙氨酸转化为酪氨酸,只能在转氨酶作用下生成苯丙酮酸。游离苯丙氨酸及苯丙酮酸在患者血液、脑脊液和体内蓄积,对神经系统造成损害并影响体内色素代谢。大量的苯丙酮酸可自尿内排出,有特殊鼠臭气味。   

3.酪氨酸尿   酪氨酸尿为较少见遗传代谢病。测定血清和尿液中酪氨酸有助于酪氨酸尿症的诊断。   (四)含铁血黄素   含铁血黄素为含有铁质的棕色色素颗粒,是一种不稳定的铁蛋白聚合体。当尿液中出现含铁血黄素则为含铁血黄素尿。当血管内溶血发生时,大部分血红蛋白自尿中排出;另有部分被肾小管上皮细胞重吸收,并在细胞内分解成含铁血黄素,而后随细胞脱落由尿中排出。当尿液中细胞分解时含铁血黄素也可被释放到尿中。常用普鲁士蓝铁染色法检测。   

1.参考值阴性。

2.临床意义   阳性表示肾实质有铁的沉积。可见于:慢性血管内溶血、阵发性睡眠性血红蛋白尿、“行军性”肌红蛋白尿、自身免疫性溶血性贫血、恶性贫血、严重肌肉疾病等。当尿中血红蛋白量较少时,隐血试验可能阴性,此时可进一步检测是否有含铁血黄素。但是,应注意在溶血初期虽有血红蛋白尿,但因血红蛋白尚未被肾上皮细胞摄取,不可能形成含铁血黄素,因此本试验可呈阴性反应。   

(五)卟啉尿   卟啉是机体合成血红素的中间体,为构成动物血红蛋白、肌红蛋白、过氧化氢酶、细胞色素等的重要成分。卟啉尿是一种症状,产生卟啉尿的疾病为卟啉症,是一类先天性或获得性卟啉代谢紊乱的疾病:①急性间歇性卟啉症:是一种常染色体显性遗传性疾病。急性发作期,尿中卟胆原和δ-氨基-γ-酮戊酸的日排泄量显著增高,据此基本可以明确诊断。②先天性红细胞生成性卟啉症:是一种常染色体隐性疾病,由尿卟啉原Ⅲ辅合酶缺乏引起。尿中的卟啉以尿卟啉和粪卟啉为主,卟胆原和δ-氨基-γ-酮戊酸水平正常,粪便中以粪卟啉为主。   ③迟发性皮肤卟啉症:是最常见且最易治疗的卟啉症,由肝脏中尿卟啉原脱羧酶缺乏引起。诊断特征是尿中以尿卟啉为主,且粪便中异粪卟啉增多。尿中δ-氨基-γ-酮戊酸可以轻度增高而卟胆原正常。

尿液分析仪及其临床应用

要点1:   

尿液分析仪检测试带   

多联试带的基本结构采用了多层膜结构:第一层尼龙膜起保护作用,防止大分子物质对反应的污染,保证试带的完整性;第二层绒制层,包括碘酸盐层和试剂层,碘酸盐层可破坏维生素C等干扰物质,试剂层与尿液所测定物质发生化学反应;第三层是固有试剂的吸水层,可使尿液均匀、快速地浸入,并能抑制尿液流到相邻反应区;最后一层选取尿液不浸润的塑料片作为支持体。   

  如图:干化学尿试带基本结构示意图   要点2:   

临床应用及注意事项   

1.尿酸碱度   主要用于了解体内酸碱平衡情况,监测泌尿系统患者的临床用药情况,了解尿pH变化对试带上其他膜块区反应的干扰作用。须注意:①检测时应使用新鲜尿液标本。标本放置过久,因尿液中细菌繁殖,分解尿素产生氨,使尿液呈碱性;或尿液中CO2自然扩散造成的丢失,使pH增高。②检测时应严格按照使用说明书操作。试带在尿液中浸渍时间过长,有使尿pH减低的趋势,出现假阴性结果。   2.尿比密   主要用于了解尿液中固体物质的浓度,估计肾脏的浓缩功能。在出入量正常的情况下,比密增高表示尿液浓缩,比密减低则反映肾脏浓缩功能减退。须注意:①尿液标本必须新鲜,不能含有强酸、强碱等物质。使用干化学尿比密测定时,变化范围为pH6.2~7.0。   当尿液pH≥7.0时,造成结果偏低,应在干化学测定结果的基础上增加0.,作为由于碱性尿损失的补偿。②干化学尿比密测定结果表达值的变化范围在1.~1.,间隔值较大(0.),不能反映较小的比密变化。对于比密范围在1.~1.的新生儿尿液,也不宜使用此法。③尿液中蛋白或糖浓度增加将使比密结果增加;尿素大于10g/L或pH小于6.5时,致比密结果减低。   3.尿糖   (1)尿糖测定方法学的差异   干化学尿糖检测原理是基于葡萄糖氧化酶的酶促反应,只与葡萄糖反应,特异性强;班氏法是基于铜还原的原理,尿液内所有还原糖(葡萄糖、乳糖、半乳糖等)和所有还原性物质(如维生素C等)都起反应。用干化学法测定结果为阴性的标本,如用班氏法则可能呈现阳性结果。   同时,干化学法较之于班氏法有更高的灵敏度,为2~5mmol/L。当葡萄糖含量为1.67~2.78mmol/L时,用干化学法即可出现弱阳性,而班氏法在8.33mmol/L时才会呈现弱阳性。   (2)尿液中维生素C对尿糖测定的影响:尿液在低葡萄糖浓度(14mmol/L)时,维生素C与试带中的试剂发生竞争性抑制反应,使干化学法产生假阴性反应,而班氏法产生假阳性的结果。   

排除方法是:先将尿液煮沸几分钟再进行试验,或选用具有抗维生素C能力或能测定维生素C的试带,了解尿液内维生素C的浓度,注意维生素C对尿糖测定的影响。   (3)尿液被过氧化物、次氯酸盐、强氧化性清洁剂污染可使尿糖呈现假阳性结果;尿液中含有L-多巴、大量水杨酸盐、氟化钠、维生素C超过mg/L、尿酮体超过0.4g/L或尿比密过高,则将使尿糖呈现假阴性结果。   4.尿蛋白质   (1)尿液pH对尿蛋白测定的影响   应使用新鲜尿标本。不管尿液是由于保存不当引起pH大的变化,还是尿液本身过酸、过碱都会影响实验结果。当患者服用奎宁、嘧啶等药物,或尿液中含有聚乙烯、吡咯酮、洗必泰、磷酸盐、季铵盐消毒剂等时,引起尿液呈强碱性(pH≥9.O),超过了试带的缓冲能力,使干化学法出现假阳性结果;当尿液pH≤3.0时,会引起干化学法出现假阴性结果。   

(2)灵敏度:干化学法对尿内不同蛋白质成分的灵敏度不一,主要对清蛋白敏感(70~mg/L),而对球蛋白、黏蛋白、本周蛋白不敏感。因此,对于肾病患者,特别是在疾病发展过程中需要系统观察尿蛋白含量的病例,最好使用对白、球蛋白灵敏度一致的磺柳酸法或双缩脲法进行定性和定量测定。   (3)药物干扰:多种药物可使尿蛋白干化学法检查结果呈假阳性或假阴性,如青霉素族药物。滴注青霉素万U、2h,万U、3h,万U、5h,尿蛋白测定可呈假阴性。   (4)其他:标本含生殖系统分泌物或较多细胞成分时,尿蛋白测定可呈假阳性。   5.尿酮体   主要用于糖代谢障碍和脂肪不完全氧化的疾病或状态的诊断及其他相关疾病的诊断和治疗。须注意:①标本必须新鲜,由于尿酮体中丙酮和乙酰乙酸都具有挥发性;乙酰乙酸受热易分解成丙酮;尿液中细菌污染后,细菌繁殖使酮体消失等,导致检测结果偏低或假阴性。   

②干化学法对酮体各组成成分的灵敏度不一:乙酰乙酸为50~mg/L,丙酮~mg/L,与β-羟丁酸不发生反应。由于不同病因引起的酮症,其酮体成分不一,同一患者在不同病程,酮体成分亦会发生变化,因此干化学检测所得结果可能与实际总的酮体量有所差异。③试带受潮,可呈现假阴性结果;尿液含酞、苯丙酮、L-多巴代谢物、甲基多巴,可呈假阳性。   

6.尿胆红素与尿胆原   主要用于消化系统肝脏、胆道疾病及其他相关疾病的诊治监测,尤其对于黄疸的鉴别有特殊意义。   须注意:①标本必须新鲜,避免胆红素在阳光照射下氧化为胆绿素、尿胆原氧化为尿胆素。   ②当患者接受大剂量氯丙嗪治疗,或尿液中含有高浓度的维生素C(>mg/L)、亚硝酸盐,或含有盐酸苯偶氮吡啶代谢产物时,可因其抑制偶氮反应,使胆红素检测呈现假阴性;尿液中含有吩噻嗪类或吩嗪类药物时,可使胆红素呈现假阳性。   ③尿液中一些内源性物质如胆色素原、吲哚、胆红素等和一些药物如吩噻嗪类、维生素K、磺胺药等,因颜色干扰,尿胆原检测时呈假阳性;而亚硝酸盐、重氮药物、对氨基水杨酸则在尿胆原检测时呈假阴性。   7.尿隐血   主要用于肾脏、泌尿道疾病及其他相关疾病的诊断、治疗。   须注意:尿液中含有肌红蛋白、对热不稳定酶、氧化剂或菌尿,可使干化学法尿隐血测定呈现假阳性结果;尿液中大量维生素C的存在(>mg/L),可竞争性抑制反应,产生假阴性结果。   

8.尿亚硝酸盐   主要用于尿路细菌感染的快速筛检。

须注意:尿亚硝酸盐试验是细菌感染的指标,阳性结果的产生取决于3个条件:

①尿液中的致病菌须含有硝酸盐还原酶;

②体内有适量硝酸盐的存在;

③尿液在膀胱内有足够的停留时间(>4h)且排除药物等干扰因素。

干化学法亚硝酸盐诊断大肠埃希菌感染的阳性符合率为80%,但考虑到标本放置时间过久、尿液被亚硝酸盐或偶氮剂污染可呈假阳性结果的因素,仍须慎重解释阳性结果。同时,结果阴性并不能排除菌尿的可能,尿胆原、维生素C、尿pH大于6、尿量过多,均可致亚硝酸盐检测假阴性。   

9.尿白细胞   主要用于肾脏、泌尿道疾病的诊断、治疗等。须注意:   ①中性粒细胞胞质中含有酯酶,而单核细胞、淋巴细胞胞质中则无酯酶,因此,干化学白细胞检测只对粒细胞敏感。   ②尿液标本污染甲醛或高浓度胆红素,或使用某些药物如呋喃妥因时,结果可呈假阳性。尿液含维生素C,或含大剂量先锋霉素Ⅳ、庆大霉素等药物,或尿蛋白大于5g/L时,结果可呈假阴性。   10.尿维生素C   维生素C检测的灵敏度依所用试剂带的不同而有所不同,一般为50~mg/L。维生素C在碱性环境中极不稳定,容易分解,尿液标本应及时测定,以免结果偏低。   尿液中维生素C含量的高低对血红蛋白、胆红素、葡萄糖及亚硝酸盐可产生严重的负干扰,干扰的程度随维生素C浓度的增加而增加。因此,维生素C检测的作用在于提示其他项目检测结果的准确性,防止假阴性的出现,使各项干化学检测结果更真实。   质量控制   (1)检测中质量控制   ①保证仪器处于正常状态。   ②仪器和试带的质量控制,每日对仪器和试带按规范化质控程序进行,每次使用“正常”和“异常”两种浓度的质控尿液。任意一个试剂膜块的测定结果与质控尿液期望“靶值”只允许有1个定性等级的差异,超过此范围或结果在“正常与异常”之间跳跃均应视为失控。   (2)检测后质量控制   应分析检测结果之间的关联性,即尿化学分析结果与显微镜镜检结果的相互关系,如出现:   ①化学分析隐血阴性,而镜检见多量红细胞;②化学分析隐血强阳性,而镜检却不见或仅见极少量红细胞;③化学分析白细胞阴性,而镜检见多量白细胞;④化学分析白细胞阳性,而镜检不见或仅见极少量白细胞;⑤化学分析亚硝酸盐为阳性,而尿蛋白质和白细胞均为阴性;   ⑥尿镜检红细胞、白细胞和管型增多,而尿化学分析蛋白质为阴性,等等。   这些均被视为可疑结果,应进一步查明原因。还应注意维生素C含量对其他检测结果的影响;注意临床诊断和检验结果的符合性,如有明显矛盾或与最近一次检测结果有重大差异,应及时联系临床医师共同探讨造成差异的可能原因。

要点3:   

尿有形成分分析仪   

传统的尿液沉渣分析,是将尿液经过离心,取沉渣在显微镜下观察、计数。尿有形成分分析自动化的研究难度虽然较大,但已有实用性发展。   目前,尿沉渣分析仪主要有两大类:①基于尿沉渣镜检影像分析原理;②基于尿沉渣流式细胞术和电阻抗检测原理。   临床应用   1.对于红细胞分析   尿沉渣红细胞数量可帮助血尿有关疾病的诊断和鉴别诊断;通过动态观察这类患者尿红细胞数量的变化,可以确定患者的治疗效果和判断预后。   尿沉渣分析仪提供的红细胞形态相关信息,对鉴别血尿肾性或非肾性来源具有一定的筛检鉴别作用。   2.对于白细胞与细菌分析   尿沉渣白细胞数量可协助诊断和鉴别诊断泌尿系统的感染、膀胱炎、结核、肿瘤等疾病;动态观察患者尿白细胞数量的变化,有助于确定患者的治疗效果和预后。   白细胞、细菌组合检查对泌尿系感染的诊断有着重要意义。   3.对于上皮细胞分析   尿沉渣分析仪能给出上皮细胞的定量结果,并标记出是否含有小圆上皮细胞,但并不能准确区分肾小管上皮细胞、中层或底层移行上皮细胞。   4.对于管型分析   管型对诊断肾脏实质性病变有重要价值。但由于管型的种类较多,且形态特点各不相同,仪器只能区分出透明管型和病理管型。   当仪器标明出现病理管型时,须进一步用显微镜检查尿沉渣进行准确分类。   5.其他   当仪器提示有酵母细胞、精子细胞和结晶时,均应离心镜检。   要点4:   

尿干化学分析仪主要优点和不足   

主要不足:不能替代显微镜对病理性尿标本的检查,特别是管型、结晶、上皮细胞、淋巴细胞、单核细胞等其他有形物质;尿蛋白试带以检测清蛋白为主,对球蛋白不敏感,故不适用于肾病患者;易受多种药物或其他外源性物质或人为因素等因素的干扰,出现假阳性或假阴性。   要点5:   

尿干化学分析检查与显微镜检查结果的比较   

尿液干化学分析仪与传统显微镜检查是两种原理不同的检验技术,在临床中可能出现化学法分析结果与镜检结果不相符的情形。   如:(1)白细胞:   ①分析仪法(+),镜检法(-):可能的解释为尿液在膀胱贮存时间过长或其他原因致使白细胞破坏。   ②分析仪法(-),镜检法(+):多发生在尿液中以淋巴细胞或单核细胞为主时,应以显微镜检查结果为准。   (2)红细胞:   ①分析仪法(+),镜检法(-):可由于尿液中红细胞常被破坏而释放出血红蛋白,或某些患者尿液中含有对热不稳定酶、肌红蛋白或菌尿,引起红细胞干化学法测定结果的假阳性。   ②分析仪法(-),镜检法(+):可发生在尿液中含有大量维生素C(>mg/L)或试带失效时。   要点6:   

中华医学会经过多次专家研讨会,制定了尿液干化学分析仪筛检标准。   当干化学尿试带质量合格、尿液分析仪运转正常情况下,试验结果中白细胞、红细胞、蛋白及亚硝酸盐全部为阴性时,可以免去对红细胞和白细胞的显微镜检查,但如果其中有一项阳性结果,必须同时进行显微镜检查。这个筛选条件的基本原则是能筛检出健康人标本,但不遗漏异常标本,避免出现假阴性。对出现假阳性的标本,则可以通过镜检进一步排除,以达到不误诊的目的。   筛检具有局限性:   ①肾脏科患者尿液不适合用干化学检查,而应作湿化学及显微镜检查。   ②以镜检有形物质(如结石、结晶等)结果作为主要诊断依据和观察疗效指标时,适用于上述原则。   要点7:   

尿沉渣分析仪检查与显微镜检查   

显微镜方法进行尿沉渣分析,将尿液中有形成分直观、真实地呈现于镜下,这种传统的手工操作方法其各个环节难以进行控制和定量化报告,标准化进程缓慢。   影像式尿沉渣分析仪,经过严格的定时、定速离心,留取定量的尿沉渣,以标准单位定量报告,同手工显微镜方法相比,它的分析定量标准、视野清晰、精确度较高,但许多步骤仍需人为操作,仍可能存在人为误差。   流式细胞术尿沉渣分析仪分析尿液,不需离心,标本用量少,检测细胞多;检测速度快;每一标本检测步骤一致,易于质量控制和标准化,因而检测精确度较高,但不能鉴别病理性管型、异常细胞、结晶等,大量细菌、酵母菌还会干扰计数,对影红细胞容易漏诊。   因此,目前的流式细胞术尿沉渣分析仪还不能完全取代显微镜镜检。此外,国内尚未建立公认的尿沉渣分析仪检查结果的参考值,其临床实际应用价值尚需更多的临床实践。   

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长按







































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