化学发光免疫分析常见问题汇总

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时间分辨免疫技术酶免胶体金法化学发光四种方法的区别？

答：1学发光免疫分析(CLIA)：是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项最新免疫测定技术。?2时间分辨荧光免疫测定（TRFIA）：是以镧系元素标记抗原或抗体，并与时间分辨测定技术结合而建立起来的一种新型非放射性微量免疫分析技术，它根据镧系元素螯合物的发光特点，用时间分辨技术测量荧光，同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨，可有效地排除非特异荧光的干扰，极大地提高了分析灵敏度。3酶联免疫吸附测定（ELISA）：是在免疫酶技术的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术,ELISA过程包括抗原（抗体）吸附在固相载体上称为包被，加待测抗体（抗原）,?再加相应酶标记抗体（抗原）,生成抗原（抗体）－－待测抗体（抗原）－－酶标记抗体的复合物，再与该酶的底物反应生成有色产物。借助分光光度计的光吸收计算抗体（抗原）的量。待测抗体（抗原）的定量与有色产生成正比。灵敏度比上面两种方法差。4.胶体金法：由胶体金标记技术发展起来的胶体金免疫快速诊断技术，主要有两种：快速斑点免疫金渗滤法和胶体金免疫层析法。后者具有操作简便（浸入液体中就行）、快速（全程5~10分钟搞定）、无需仪器设备（结果目测就OK）、试剂稳定、成品易于保存（保质期1~2年）等优点，是科学研究和临床诊断的有力工具。

N-乙酰葡萄糖苷酶

答：β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)可水解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷，也能水解β-N-乙酰氨基半乳糖苷。该酶广泛存在于各种组织器官、体液、血细胞中，是溶酶体中的一种酸性水解酶。其测定方法有比色法和荧光光度法，血、尿NAG活性测定对反映肾实质病变，尤其是急性损伤和活动期病变更敏感，主要用于早期肾损伤的监测和病情观察。(1)肾小管疾病:重金属(汞、铅、镉等)及药物性肾损伤、缺血、缺氧、失血、休克等均可引起NAG活性增加。(2)肾病综合征:尿NAG常明显增加，缓解期下降，复发时迅速回升，故可作为临床观察指征。肾小球肾炎急性期变化较大，但与肾小管损伤相比，变化幅度较小。(3)尿路感染的定位诊断:急、慢性肾盂肾炎尿NAG上升，能与单纯性膀胱炎区别。可用于早期上尿路感染的诊断。(4)肾移植排斥反应的监测:肾移植排斥反应早期NAG即可升高，比尿蛋白、血肌酐、肌酐清除率更敏感。(5)糖尿病肾痛早期诊断:糖尿病肾病尿NAG升高，用于本病的早期诊断优于尿白蛋白及β2-微球蛋白。

生化分析仪定标

答：定标就是要找出一个参考点，就是一个K值（或F值）。它是由仪器与试剂状态确定下来的。当我们测定一个标本时，无论您是用手工的方法或全自动生化分析仪，测出来的值只是一个吸光度，这个吸光度对我们没有什么意义，我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性。那就要乘上一个K值，计算并打印出来的结果对我们就有意义了。K值就是我们通过定标找出来的。一般上最低要求是由试剂空白与标准品。经过仪器测定出两个吸光度。?K=标准浓度/(A标准－A试剂空白)标准液的浓度我们是知道的，这两个吸光度可以由仪器测出，这样就得出一个K值。无论什么样的标本，用其吸光度乘以K值我们就得到了答案。因此，K值具有非常决定性的意义，可以决定标本的准确性

单纯疱疹

答：疱疹病毒是一种存在包膜构造的双链DNA病毒,大量生存于自然界内,可侵入人体和动物体会发生感染,病毒通常经由黏膜、皮肤、神经组织等感染机体而致相关的病变。其可分成HSV-1与HSV-2两种血清类型,感染HSV-1后主要会导致咽炎、唇疱疹、角膜炎,严重者会造成散发性脑炎等危险疾病;HSV-2主要经由受损皮肤和黏膜侵入而致生殖器疱疹。这些年来有研究表明,引发生殖器疱疹病毒的病原体中,HSV-1与HSV-2都存在重要作用，而感染这两种病毒后其可长期潜伏于机体内。

降钙素

答：PCT是血清降钙素（CT）的前肽物质，是由个氨基酸组成的糖蛋白质，在正常生理情况下，由甲状腺C细胞分泌产生。健康人血液中的PCT浓度非常低，小于0.05ng/ml。在炎症刺激特别是细菌感染或脓毒血症状态下，机体各个组织、多种细胞类型均可产生PCT并释放进入血液循环系统。PCT是近年来普遍使用的细菌感染生物标志物，其最初在ICU中使用较为广泛，由于临床价值明显，逐渐推广到其它科室。其在全身细菌性感染诊断和鉴别、对疗效的监测和预后判断等领域，相比传统的WBC、CRP以及各种炎症反应因子（IL-2\IL-6\细菌内毒素）更有临床实用价值。

微生物平板

答：微生物培养平板培养基是被用于获得微生物纯培养的最常用的固体培养基形式，它是冷却凝固后的固体培养基在无菌培养皿中形成的培养基固体平面，常被简称为培养平板。也叫平面培养基、平皿培养基。平板培养基常用于单孢分离，测定菌丝生长速度，观察菌落的形态，拮抗实验，测定接种空间杂菌数等。

肌酐定标

答：对于肌酐定标大多数检验室习惯以单一标准来校准结果,原则上应在标准曲线呈通过原点的直线时才可作这样的处理;呈不通过原点的直线关系时,至少应使用两点定标;呈抛物曲线状时,应使用多点定标。“单点定标”作校准是有条件的,如果厂家有关方法稳定性文件或者自建检测系统的评价中,已经证明该项目性能特点之一的标准曲线是线性关系,而且a值几乎为0,即Y=bX,则可以用单点定标作校准,否则则会存在截距a造成偏差,离定标点较远的浓度标本会造成较大偏差。

淀粉酶

答：淀粉酶主要由唾液腺和胰腺分泌，可通过肾小球滤过。1.升高：（1）急性胰腺炎：血和尿中的AMY显著增高。发病后8～12h血清AMY开始增高，12～24h达高峰，2～5天下降至正常。尿AMY约于发病后12～24h开始升高，下降比血清AMS慢，因此，在急性胰腺炎后期测定尿AMY更有价值。特别是急性胰腺炎时。（2）流行性腮腺炎（3）急性阑尾炎、肠梗阻、胰腺癌、胆石症、溃疡病穿孔及吗啡注射后等均可见血清AMY增高，但常低于U。2.降低：正常人血清中AMY主要由肝脏产生，故血清与尿中AMY同时减低主要见于肝炎、肝硬化、肝癌及急性和慢性胆囊炎等。肾功能障碍时，血清AMY也可降低。

孕三项

答：现代妇产科受孕检查倡导联合检查机制,采用“孕酮+血人红毛膜促性腺激素(β-HCG)+雌二醇”等3种联合检查方式,可综合保障检测效率。HCG是受精卵着床后,由绒毛滋养层的合体细胞分泌的一种糖蛋白激素,由α、β两个亚基组成,其中β-HCG对妊娠具有特异性。血清孕酮在妊娠早期是由卵巢黄体和妊娠滋养细胞分泌合成的,是维持妊娠必要的一种甾体类激素;妊娠8周后主要来自胎盘,妊娠12周后胎盘完全形成,血清孕酮水平将会迅速升高,因此妊娠12周以前,血清孕酮的水平是稳定而且不依赖于孕龄的。雌二醇主要由卵巢分泌,促使输卵管黏膜上皮细胞分泌活动增加和纤毛生长加快,促进受精卵经输卵管运行至子宫腔。

D2

答：通常血液中纤维蛋白单体经活化因子xIII交联后,再经活化的纤溶酶水解产生特异的降解产物称为“纤维蛋白降解产物”。D-二聚体是最简单的纤维蛋白降解产物，其质量浓度的增加反映体内高凝状态和继发性纤溶亢进。D-二聚体的临床检测主要应用在静脉血栓栓塞（VTE）、深静脉血栓形成（DVT）和肺栓塞（PE）的诊断。增高见于继发性纤维蛋白溶解功能亢进，如高凝状态、弥散性血管内凝血、肾脏疾病、器官移植排斥反应、溶栓治疗等。

线索细胞

答：线索细胞是加特纳菌或小杆菌（这两种菌常见）感染正常的鳞状上皮细胞，使正常的上皮细胞形态发生改变，如边缘不整齐、粗糟、透明度不高等。线索细胞是指阴道脱落上皮细胞上粘附大量加特纳杆菌等厌氧菌的一种，一般预示患了细菌性阴道病，当然还要结合其它几项重要指标来确诊，一般是PH值，胺试验及分泌物性状等指标。

临床上乙肝两对半1、2、4、5阳性

抗凝剂

答：抗凝剂--能阻止血液凝固的化学试剂。?(一)枸橼酸盐主要为枸橼酸三钠，能与血液中钙离子结合形成螯合物，从而阻止血液凝固。枸橼酸钠与血液的抗凝比例是1∶9或者1∶4，一般用于凝血和红细胞沉降率的检查。因其毒性小，也是输血保养液的成分之一。(二)肝素肝素是一种生理性抗凝剂，广泛在于肺、肝、脾等几乎所有组织和血管周围肥大细胞和嗜碱性粒细胞的颗粒中。它是一种含硫酸基团的粘多糖，是分散物质，平均分子量为10，带有较多负电荷。其抗凝机制较为复杂，主要是加强抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)灭活丝氨酸蛋白酶的作用，从而阻止凝血酶的形成，并且有阻止血小板聚集等多种抗凝作用。常用于血细胞比容、血pH、血气分析及其他生化测定，是红细胞渗透脆性试验理想的抗凝剂。每管加含肝素1g/L的溶液1mL，在60℃以下烘干备用，可使5～10mL血液不凝。肝素抗凝血不适于血涂片检查。因其在瑞氏染色时会出现背景偏蓝，不适全血液学一般检查，也不适合凝血因子的检查。(三)乙二胺四乙酸盐(EDTA)常用的有钠盐和钾盐，能与血液中的钙离子结合形成螯合物，使钙离子失去凝血作用，从而达到抗凝目的。对血细胞形态和血小板计数影响很小，适用于多项血液学检查，尤其是血小板计数，但钠盐溶解度低于钾盐，EDTA-K2最适用于全血细胞分析及血细胞比容测定，室温下6h，红细胞体积不改变。国际血液学标准化委员会(ICSH)建议血细胞计数使用EDTA-K2作为抗凝剂，用量为EDTA-K2-2H2O1.5~2.2mg/ml血液。EDTA可抑制血小板聚集，不适用于凝血检查及血小板功能试验。

参考资料：化学发光、检验医学信息网等，如涉及侵权，请联系删除。

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