案例分享1例CD38单抗干扰输血相容性检

前言

CD38是一种兼具受体及外切酶活性的Ⅱ型跨膜糖蛋白，参与细胞黏附与跨膜信号传导过程，具有接收器和酵素功能，在浆细胞(plasmacell)及骨髓前驱细胞会表达特别高，在包括多发性骨髓瘤（MM）在内的血液恶性肿瘤中高度表达，是理想的免疫治疗靶点。

患者男，19岁，于我院血液科住院治疗，临床诊断为：急性混合型白血病。既往有造血干细胞移植史、输血史。既往交叉配血正常。5月21日血常规提示HB60g/L，临床申请输注AB型Rh阳性去白细胞悬浮红细胞2u。

第一次交叉配血：随机选择一袋与患者ABO同型的供血者标本进行交叉配血。盐水介质法交叉配血结果：主次侧均阴性。抗人球蛋白微柱凝胶法交叉配血结果（图1）：主次侧均凝集，主侧2+，次侧1+。

另选4袋同型供血者进行交叉配血，抗人球蛋白微柱凝胶法结果如图2。考虑患者存在疑难配血。

图1.第一次抗人球蛋白微柱凝胶法交叉配血结果

图2.第二次抗人球蛋白微柱凝胶法结果

首先复查患者血型，复查结果（图3）：正反定型均为AB型，血型结果无误。

图3.血型复查结果

完善不规则抗体筛查，结果（图4）示：号细胞阳性。

图4.不规则抗体筛查结果

实验室检验结果总结

询问患者近期用药史

病人为急性混合型白血病，患者淋巴细胞和单核细胞免疫表型提示CD38高表达，分别于5月16、17日使用CD38单抗达雷妥尤进行治疗。

分析原因及处理

查阅相关文献，患者既往配血正常，近期有使用CD38单抗史，考虑CD38单抗对交叉配血造成干扰。筛选与患者ABO及Rh血型系统同型的供血者标本进行盐水介质和凝聚胺介质交叉配血，选择配血结果阴性的供血者血液予以输注。

输血后评估

患者输血过程及输血后无特殊不适，无输血相关性不良反应发生。复查血常规，血红蛋白较前上升（图5），红细胞输注有效。

图5.5月21、22、24日患者血常规变化

CD38单抗达雷妥尤（DARA）是一种人CD38IgG1单克隆抗体，由含有人免疫球蛋白基因的转基因小鼠生成，是第一个被美国食品药品管理局(FDA)批准用于治疗MM的单克隆抗体。DARA主要通过以下几种机制有效地杀死MM细胞:补体依赖细胞毒性(CDC)、抗体依赖细胞介导的细胞毒性(ADCC)、抗体依赖细胞吞噬(ADCP)以及通过交联反应直接诱导细胞凋亡。

CD38单抗能够特异性地与肿瘤细胞表面的CD38抗原表位结合，有效清除肿瘤细胞，如MM细胞。然而，CD38除了在MM肿瘤细胞上表达之外，也在红细胞上低表达，CD38单抗与表达了CD38抗原的红细胞结合会干扰输血相容性检测。其中最常见的为CD38单抗对IAT的干扰，干扰的主要机制为:CD38单抗与红细胞表面上的CD38结合，主要因为anti-CD38是IgG1κ的单株抗体，红细胞带有微量CD38抗原，在加入抗球蛋白试剂后引起非红细胞意外抗体凝集（图6）。故以间接抗人球实验法检验包括管柱凝集法、传统抗球蛋白三项法之抗体筛检、抗体鉴定皆呈全部1+~2+阳性反应。据文献报道，该干扰效应在患者停用CD38单抗后可持续6个月[1]。

图6.来自论文《CD38单克隆抗体对输血相容性检测干扰及其应对方案的专家共识》

在明确患者存在使用CD38单抗并且排除存在不规则抗体的情况下，可以使用多种方法克服CD38单抗对输血相容性检测的干扰。

二硫苏糖醇(Dithiothreitol，DTT)处理红细胞，这是目前国际上消除CD38单抗干扰的最常用方法，DTT能裂解CD38分子胞外区的二硫键，使CD38抗原变性，并阻止其与CD38单抗结合。巯基还原剂-二巯基乙醇(2-mercapto-ethanol，2-Me)，对红细胞抗原具有和DTT相同的化学作用。

凝聚胺(Polybrene)试验是一种简单快速的红细胞抗体检测方法，凝聚胺是一种小分子量季铵盐，可以和红细胞表面带负电荷的分子结合，在低离子环境下，CD38分子在胞外携带负电荷的羧基，极易与凝聚胺分子结合，进而干扰CD38分子与CD38单抗的结合。

还有其他使用较少的方法，如：蛋白水解酶法、红细胞表型分型和基因型分型、中和蛋白试验[2]。DTT,2-ME和菠萝蛋白酶对红细胞表面CD38抗原去除效果比较如表1所示。具体处理方法如下：

将2%~5%红细胞悬液与0.2mol/LDTT、0.2mol/L2-ME或1%菠萝蛋白酶按照体积比1∶1分别混匀。

37℃孵育30min洗涤后制备试验用红细胞悬液，以未经处理的红细胞悬液作为阳性对照。

表1.来自论文《三种试剂对红细胞表面CD38抗原去除效果的研究》

通过这个案例分享，我们得出经验，患者使用CD38单抗后会影响输血相容性检验，用药期间建立临床医师与输血科实验室之间的及时、有效沟通至关重要，尤其要向输血科实验室提供患者完整、准确的输血和药物史。为避免因使用CD38单抗，影响输血前检测，导致患者无法得到及时输血治疗，医院或者输血科制定相应程序或(和)备案，临床医师建立患者输血预案。

[1]OostendorpM，LammertsvanBuerenJJ，etal．Whenbloodtrans-fusionmedicinebe