真菌检查中G试验与GM试验的区别

　真菌，是一种真核生物。最常见的真菌是各类蕈（音xùn）类，(其实就是蘑菇，我们经常看到影像学中提到的蒂，就是真菌的梗)另外真菌也包括霉菌和酵母。现在已经发现了七万多种真菌，估计只是所有存在的一小半。大多真菌原先被分入动物或植物，现在成为自己的界，分为四门。真菌自成一门，和植物、动物、细菌相区别。真菌和其他三种生物最大的不同之处在于：真菌的细胞有含甲壳素（又叫几丁质、壳多糖）为主要成分的细胞壁，和植物的细胞壁主要是由纤维素组成的不同。细菌细胞壁主要成分则是肽聚糖，真菌细胞壁中主要成分为几丁质、纤维素、葡聚糖、甘露聚糖等，这些多糖都是单糖的聚合物。●★●★●★●★●★●★●★●★●★●★●★●★●★●★●★●★●★●★●★●★●★●★●★●★G试验检测真菌的细胞壁成分--(1,3)-β-D-葡聚糖。而其他微生物、动物及人的细胞成分和细胞外液都不含这种成分。鲎（[hòu]一种节肢动物，甲壳类，生活在海中，尾坚硬，形状像宝剑，居住于沙质浅水海域，常爬行或全身潜行于泥沙中）凝血系统中的凝血酶原G因子能识别这种葡聚糖，是G的天然检测者。G因子的α亚基特异性识别G后，可激活血清凝固酶原上的β亚基，形成凝固酶，凝固酶可以参与凝血酶原级联反应，使凝固蛋白原转变为凝胶状的凝固蛋白。因此在机体的体液中检测到(1-3)-β-D葡聚糖是诊断深部真菌感染的有效依据。当人体的吞噬细胞吞噬真菌后，能持续释放1-3-β-D-葡聚糖，使血液中含量增高。即使不能确定菌种，但能肯定是否有真菌感染。指导临床科学合理的使用抗真菌药物，因此可以作为侵袭性真菌感染的早期诊断指标。当检测到标本中葡聚糖含量较高时，即可予以系统治疗，不必等待真菌培养的结果，对临床医生采取积极的治疗提供依据，且动态快速检测，不受血中抗生素和酶等的影响。

G试验的干扰因素

1.假阳性：

（1）使用纤维素膜进行血透，标本或患者暴露于纱布或其他含有葡聚糖的材料

（2）静脉输注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品

（3）链球菌血症

（4）高免疫球蛋白（多发性骨髓瘤患者）

（5）食用菌类，如蘑菇等食物可以导致假阳性

（6）操作者处理标本时存在污染。另外，使用多糖类抗癌药物、放化疗造成的粘膜损伤导致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌经胃肠道进入血液等也可能造成假阳性

2.假阴性：

（1）接合菌（毛曲酶，根曲酶等）细胞壁不含1-3-β-D-葡聚糖

（2）隐球菌，具有厚壁胞膜，在免疫缺陷患者体内生长缓慢，导致试验呈假阴性。

（3）定值菌不会使1-3-β-D-葡聚糖升高，故G试验阴性。

G试验的临床意义

1.区分细菌感染和真菌感染

2.区分真菌定值与感染（定值真菌不引起1-3-β-D-葡聚糖升高，即使严重定值）

3.辅助诊断侵袭性真菌病（IFD）和真菌血症（G试验阳性是国际接受的IFD诊断的微生物学标志之一。）

4.IFD的疗效评价。

总结

虽说G试验检测一般先于临床症状平均4天，平均早于发热5天，是早期检测的重要手段。但并不是所有真菌细胞壁都含有1-3-β-D-葡聚糖，且其影响因素较多，因此，实验室需与临床密切联系。

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GM试验曲霉菌抗原检测试剂盒，检测方法为ELISA法，检测的物质是半乳甘露聚糖抗原，主要适于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断。曲霉菌特有的细胞壁多糖成分是β（1-5）呋喃半乳糖残基，菌丝生长时，半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放，是最早释放的抗原。GM释放量与菌量成正比，可以反映感染程度，连续检测GM可作为治疗疗效的监测，在造血干细胞移植患者中的诊断敏感性高。从上表也能看出：G试验阳性，GM试验可能为阴性，如念珠菌属、镰刀菌属感染；G试验阴性，GM试验可能为阳性，如隐球菌属感染。GM试验：检测的是半乳甘露聚糖（glactomannan,GM），半乳甘露聚糖是广泛存在于曲霉和青霉细胞壁的一种多糖，菌细胞壁表面菌丝生长时，半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放，是最早释放的抗原，可以通过酶联免疫吸附试验法进行检测。GM试验：主要针对于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断。曲霉菌感染部位主要集中在肺部，从而引起肺部侵袭性曲霉，诊断曲霉菌在肺部是定植还是侵袭性生长，关键在于其是否合成GM。GM试验常可在患者临床症状出现前5-8d获得阳性结果，并可对血清、脑脊液、肺泡或支气管灌洗液进行检测，因而往往可以使诊断提前。GM试验的干扰因素假阳性：（1）使用使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦；（2）新生儿和儿童；（3）血液透析；（4）自身免疫性肝炎等；（5）食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。以下情况可出现假阴性（1）释放入血循环中的曲霉GM（包括甘露聚糖）并不持续存在而是会很快清除；（2）以前使用了抗真菌药物；（3）病情不严重；（4）非粒细胞缺乏的患者。总结

血清半乳甘露聚糖连续两次结果阳性比单独一次的结果阳性具有更大的临床意义，连续两次结果阳性作为诊断标准能提供更好的准确度。为了提高诊断结果的可靠性，可以对曲霉菌感染的高危病患进行连续监测。

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